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基于灰色关联度模型的动物药材质量评价模式研究(Ⅱ)——全蝎、蜈蚣、土鳖虫、僵蚕四种药材的质量评价

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目的：
　　 建立基于灰色关联度模型的动物药材质量评价模式，以全蝎、蜈蚣、土鳖虫、僵蚕四种动物药材为例，在对各药材中主成分核苷类、多胺类、总磷脂、总多糖、总蛋白质5类成分含量测定和比较分析的基础上，依据灰色理论中相对关联度的计算方法，以相对关联度为测度，构建灰色关联度模型，进行四种药材不同地区商品的质量评价；同时，采用多元回归分析方法，建立各药材5类成分之间的多元关系方程，以期为简化质量控制指标提供依据。
　　 材料与方法：
　　 1.材料:10个不同地区全蝎、蜈蚣、土鳖虫、僵蚕商品药材，分别购自南京、北京、沈阳等地。
　　 2.方法
　　 2.1各药材的主成分及安全性的研究
　　 2.1.1全蝎、蜈蚣、土鳖虫、僵蚕四种药材不同商品中的5类成分进的含量测定:①核苷类成分和多胺类成分采用高效液相色谱法测定；②总多糖、总磷脂、总蛋白质分别采用苯酚-硫酸，钼蓝试剂，考马斯亮蓝显色，分光光度测定。
　　 2.1.2采用微波消解-电感耦合等离子体原子发射光谱法测定全蝎、蜈蚣、土鳖虫、僵蚕商品药材中铅、汞、镉、铜及砷等有害金属元素的含量。
　　 2.2建立各药材灰色关联度质量评价模型的数据集:分别以全蝎、蜈蚣、土鳖虫、僵蚕药材所测得的主成分含量数据为基础，建立各药材灰色关联度模型的数据集，并确定同一药材中不同商品，同一测定指标参考序列的均值{Xk}、最优{Xsk}与最差{Xtk}参考序列。
　　 2.3各药材灰色关联度质量评价模型的构建与质量评价:按灰色关联度的计算要求，对所建立的数据集中的数据进行原始数据规格化处理，计算相对最优参考序列的关联系数ζik(s)，最差参考序列的关联系数ζik(t)，相对最优参考序列的关联度ri(s)，相对最差参考序列关联度ri(t)，相对关联度ri，构建各药材灰色关联度质量评价的模型；根据相对关联度的定义，同一个药材中不同样品的相对关联度ri的排序，即为该药材样品质量优劣的排序。
　　 2.4各药材中主成分间多元关系方程的建立:根据动物药材的应用特点(多水煎后使用)，以水溶性核苷类成分为因变量，其他4类成分为自变量，采用多元回归的分析方法，建立四种药材核苷类成分与多胺类、总磷脂、总多糖、总蛋白质的多元回归方程。
　　 结果：
　　 1.各药材主成分含量测定的结果:全蝎、蜈蚣、土鳖虫、僵蚕四种药材不同商品中，核苷类、多胺类、总磷脂、总多糖、总蛋白质5类主成分含量均具有差异性。
　　 2.全蝎、蜈蚣、土鳖虫、僵蚕四种药材中铅、汞、镉、铜及砷5种有害元素的含量，除全蝎商品药材中镉、铜的含量超标外，均符合《中国药典》(2005版)的限量标准。
　　 3.各药材灰色关联度质量评价结果:通过计算全蝎、蜈蚣、土鳖虫、僵蚕药材相对最优、最差的相对关联度ri值，得各药材商品的质量排序。
　　 4.各药材中主成分间多元分析结果:各药材商品中5类成分含量间的多元关系方程分别如下:
　　 全蝎:Y=0.4494X1+13.03X2+96.91X3-0.064X4-127.7
　　 蜈蚣:Y=0.154X1+77.04X2-188.4X3-0.258X4+757.0
　　 土鳖虫:Y=0.029X1-5.064X2-0.219X3+0.006X4+14.62
　　 僵蚕:Y=1.271X1+68.80X2-5.063X3+0.010X4-240.9
　　 (其中Y为总核苷、Xl为总磷脂、X2为总多糖、X3为总多胺、X4为总蛋白质含量)
　　 结论：
　　 1.全蝎药材中，总核苷的含量与总磷脂、总多糖、总多胺的含量呈正相关，与总蛋白质含量呈负相关；蜈蚣药材中总核苷的含量与总磷脂、总多糖含量呈正相关，与总多胺、总蛋白质含量呈负相关；土鳖虫药材中总核苷的含量与总磷脂、总蛋白质含量呈正相关，与总多糖、总多胺含量呈负相关；僵蚕药材中总核苷的含量与总磷脂、总多糖、总蛋白质含量呈正相关，与总多胺含量呈负相关。
　　 2.全蝎、蜈蚣、土鳖虫、僵蚕四种药材中铅、汞、镉、铜及砷5种有害元素的含量，除全蝎商品药材中镉、铜的含量超标外，均符合《中国药典》(2005版)的限量标准，表明四种药材均具有安全性。
　　 3.以相对关联度ri值为测度的灰色关联度质量评价模型，可用于全蝎、蜈蚣、土鳖虫、僵蚕动物药材的质量评价。
　　 4.全蝎、蜈蚣、土鳖虫、僵蚕药材最简化的质量检测指标，①全蝎药材至少应检测:总核苷、总蛋白质；②蜈蚣药材至少应检测:总核苷、多胺、总蛋白质:③土鳖虫药材至少应检测:总核苷、总多糖、多胺；④僵蚕药材至少应检测:总核苷、多胺类等成分的含量。

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