ST3GAL6通过调节Akt/mTOR信号通路介导miR-26a对肝细胞癌增殖、迁移和侵袭能力的调节

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目的：通过分析比较 ST3GAL6在具有不同侵袭能力的肝癌细胞株MHCC97-H(高侵袭性)和MHCC97-L(低侵袭性)中的表达差异，阐明ST3GAL6与肝细胞癌生物学特征的相关性以及在肝细胞癌中表达的临床意义，并深入探讨ST3GAL6发挥作用的主要分子生物学机制，从而为进一步提高肝细胞癌的早期诊断、治疗效果及预后提供新的研究策略及方向。
　　方法：
　　(1)应用qRT-PCR技术在人肝癌高低转移细胞株（MHCC97-H、MHCC97-L）和正常肝细胞（LO2）以及肝癌和癌旁组织中测定ST3GAL6与miR-26a的表达差异，初步探讨ST3GAL6与miR-26a在肝癌中的表达及临床意义。
　　(2)细胞增殖能力通过CCK-8细胞增殖实验与克隆形成实验测定，细胞的迁移与侵袭能力分别通过划痕实验与细胞侵袭实验测定。通过建立动物模型来测定miR-26a与ST3GAL6/Akt/mTOR通路对体内肿瘤生长速度的作用。
　　(3)应用靶基因预测网站对ST3GAL6的上游靶基因进行预测，根据预测结果选取差异的miRNAs，通过双荧光素酶实验对预测的上游靶基因进行确认。
　　(4)分别上调和下调miR-26a与ST3GAL6的表达水平，利用体外、体内实验测定改变前后的肝癌细胞生物学行为的变化，进一步探讨miR-26a与ST3GAL6在肝癌发生发展中所起的临床意义。
　　(5)应用功能获得与功能缺失实验分析miR-26a与ST3GAL6对Akt/mTOR信号通路的调节作用，Akt/mTOR信号通路活性的改变通过蛋白免疫印迹实验来检测。
　　结果：
　　(1) ST3GAL6在肝癌组织与细胞系中表达上调。
　　(2) ST3GAL6调节肝癌细胞的增殖、迁移与侵袭能力。
　　(3) miR-26a为ST3GAL6的负向调节因子。
　　(4) miR-26a通过靶向调节ST3GAL6来调控肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力
　　(5) ST3GAL6介导miR-26a对Akt/mTOR信号通路的调节作用。
　　(6) miR-26a通过ST3GAL6/Akt/mTOR通路调节小鼠体内肿瘤的生长速度。
　　结论：
　　(1) ST3GAL6在MHCC97-H与MHCC97-L细胞之间以及肝癌组织与正常肝组织之间表达水平存在差别，改变ST3GAL6的表达量能够显著改变肝细胞癌的增殖与转移能力。
　　(2) ST3GAL6通过调控下游Akt/mTOR信号通路介导miR-26a对肝细胞癌的增殖、转移能力以及体内肿瘤生长速度的调节。

著录项

作者
孙明明;
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作者单位

大连医科大学;

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授予单位大连医科大学;
学科外科学
授予学位硕士
导师姓名赵永福;
年度 2017
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类肝肿瘤;
关键词
miR-26a; 肝细胞癌; ST3GAL6蛋白; 细胞增殖; 侵袭能力; Akt/mTOR信号通路;

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