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卵泡液和胚胎培养液中MMP9的ELISA法测定及其应用于评估胚胎质量的初步探讨

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综述 基质金属蛋白酶9（MMP-9）研究的最新进展

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摘要

目的：在人类体外受精．胚胎移植(in-vitro fertilization-embryotransfer，IVF-ET)技术中，如何选择高质量的胚胎进行移植，在降低多胎率的同时不影响妊娠率一直是辅助生育领域颇受关注的课题。目前较普遍采用的胚胎形态学筛选指标还存在一定的局限性，因而有学者从多方面探索一些与胚胎发育和妊娠率相关的因素，如卵子形态、原核期评分等方面入手尝试，都取得了一些成效。近年来，关于着床相关因子与胚胎质量之间的关系引起了辅助生育工作者的兴趣，认为是一个较好的反映胚胎质量的预测指标。基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMPs)作为水解多种细胞外基质成分的一组蛋白水解酶，广泛参与胚泡的植入及胎盘形成过程。其中，明胶酶-B(MMP-9)特异表达于卵巢颗粒细胞和胚泡着床区的滋养层细胞以及子宫内膜上皮细胞局部，主要参与调节着床过程中细胞外基质的降解。因为MMP-9是哺乳动物生殖着床过程中水解细胞外基质的最重要的蛋白水解酶，所以它已经成为国际上研究最热的着床相关因子之一。本研究的目的就是分析卵泡液和胚胎培养液中MMP9的分泌与胚胎发育的关系及其对IVF-ET结局的影响。 方法：本文研究对象为2006年8月～2007年4月就诊于大连妇产医院生殖内分泌科，仅因双侧输卵管阻塞且排除其它不孕因素(男性因素、子宫内膜异位症、PCOS等)，应用长方案促排卵行IVF-ET的女性患者74例。本研究以MMP-9单克隆抗体为工具，以26例患者的90个卵泡液和48例患者的74个孕早期胚胎(2cell，4cell，6cell，8cell，融合)培养液为研究对象，通过ELISA定量检测卵泡液和胚胎培养液中MMP-9的分泌水平，应用统计学方法t检验(针对计量资料)或x<'2>检验(针对计数资料)进行分析，以观察早期胚胎不同发育阶段(2cell、4ceIl、6cell、8cell、融和胚胎)MMP-9分泌的差别。此外，选择卵泡液和胚胎培养液对应的8cell I级的胚胎进行移植，依据妊娠患者对应的卵泡液和胚胎培养液中MMP9的95﹪的置信区间临界值为界分为高分泌组和低分泌组，进一步分析两组的种植率和妊娠率，以进一步分析MMP-9的分泌水平对IVF-ET结局的影响。结果：(1)不同发育阶段胚胎对应的卵泡液和胚胎培养液中MMP9的分泌浓度比较：融>8cell>6cell>4cell>2cell，且各组之间比较有统计学意义(p<0.05)；(2)形态学评估8cell I级的胚胎对应的卵泡液和胚胎培养液中MMP9的分泌浓度是不同的，高分泌组的种植率和妊娠率明显高于低分泌组，且差异有统计学意义(p<0.05)。 结论：卵泡液和胚胎培养液中MMP-9的定量检测有望在临床实践中成为选择胚胎的一个参数，以提高胚胎种植率。

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