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【6h】

ATP竞争性mTORC2抑制剂PP242对人晶状体上皮细胞增殖的抑制作用及GRIM-19表达的影响

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目的：
　　通过体外培养人晶状体上皮细胞(HLECs)，观察ATP竞争性mTORC2抑制剂PP242对体外培养的HLECs增殖的抑制作用及干扰素/维甲酸诱导细胞凋亡相关基因19(GRIM-19)表达的影响。
　　方法:
　　对永生系HLECs系SRA01/04进行培养及传代，Cell Counting Kit-8比色法检测100，250，500，750，1000nmol/LPP242分别处理细胞株SRA01/04后12h、24h、48h细胞生长情况;将SRA01/04细胞株分为A、B、C、D组，B、C、D作为实验组分别使用100nmol/L，250nmol/L，500nmol/L PP242培养液处理，A组作为对照组使用同体积DMSO培养液处理。培养48h后应用Western blot法及实时定量RT-PCR法检测GRIM-19蛋白及其mRNA的表达情况。
　　结果:
　　100，250，500，750，1000nmol/L PP242对HLECs系SRA01/04作用12，24，48 h后，其抑制率分别为:12h组:8.59％，14.53％，19.62％，23.01％，28.80％;24 h组:10.22％,19.67％,34.92％,42.90％,46.86％;48h组:24.19％,48.13％,54.54％，61.36％，65.34％，与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05);100，250，500nmol/LPP242处理SRA01/0448 h后，Western blot检测结果显示GRIM-19蛋白的表达水平逐渐增强;实时定量RT-PCR检测结果显示，GRIM-19 mRNA表达增强，绝对定量mRNA结果分别为:0.700±0.112，0.994±0.128，1.584±0.173，与正常对照组(0.456±0.177)比较差异有统计学意义(P＜0.05)。
　　结论:
　　ATP竞争性mTORC2抑制剂PP242对体外培养的HLECs增殖存在抑制作用，其作用强度呈剂量和时间依赖性;HLECs中存在GRIM-19的表达;PP242可通过上调GRIM-19的表达抑制HLECs的增殖。

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