成人结膜干细胞定位的免疫组织化学研究

代理获取

页面导航

目录
摘要
著录项
相似文献
相关主题

摘要

目的:眼表存在两类干细胞，即分为角膜上皮干细胞和结膜上皮干细胞，它们属于单能干细胞。目前对角膜上皮干细胞的基础研究和临床应用已取得了丰硕成果，而对于结膜干细胞的研究尚处于起步阶段。由于各种原因引起的结膜上皮严重破坏、结膜功能部分或全部破坏、杯状细胞丧失等改变造成睑球粘连、粘蛋白缺乏、干眼等眼表疾病，极大影响了患者的生活质量，而结膜重建是恢复眼表正常结构和生理的有效手段。进一步研究结膜干细胞的确切定位及生物学特性、体外分离培养结膜干细胞、用组织工程构建生物结膜是结膜干细胞的研究方向。本实验利用免疫组织化学方法对细胞角蛋白K7、K14、K19及MUC5AC、P63、PCNA、AE5在不同细胞中的特异性表达进行观察，根据这些标记物在成人结膜上皮细胞中的不同部位的表达情况和分布情况，推断成人结膜上皮干细胞的定位特征。方法:1.材料及组织标本制备获取角膜移植供者的睑球结膜组织，连眼睑取出完整睑球结膜，除去皮肤及皮下软组织(睑缘保留)，沿眼球矢状面剪取眼球组织块(呈窄条状，包含全部睑结膜、球结膜、穹隆部结膜及睑结膜与皮肤交接处)，40g/L多聚甲醛固定，常规石蜡包埋，将组织蜡块制成3-5μm的切片。SP免疫组化试剂盒、DAB显色试剂盒、CK7单克隆抗体、CK14单克隆抗体、CK19单克隆抗体、P63单克隆抗体、MUC5AC单克隆抗体、PCNA单克隆抗体、AE5单克隆抗体等均购自福州迈新生物技术开发有限公司。 2.免疫组织化学取相应切片按免疫组化SP法进行染色，采用阴性对照以PBS代替一抗，阳性对照采用由迈新公司提供的阳性对照片，光镜下观察各标记物的表达和分布情况。结果:AE5及K19在所有标本的各部位结膜的表达均为阴性，P63及PCNA在近角膜缘球结膜上皮和睑缘部睑结膜的底层细胞的胞核阳性表达，K14在各部位结膜上皮的基底部均阳性表达，MUC5AC在各部位结膜上皮的杯状细胞的胞浆阳性表达，K7在穹隆部球结膜的固有层中的腺体细胞有阳性表达，MUC5AC在全部结膜的杯状细胞的胞浆阳性表达。结论:本实验中PCNA与P63的阳性表达部位一致，在近角膜缘部球结膜上皮和睑缘部睑结膜的底层细胞的胞核阳性表达以及MUC5AC，K14、K7、K19、AE5在结膜不同部位的表达情况可以推测具有分化潜力的结膜干细胞可能存在于近角膜缘部的球结膜和睑缘部睑结膜的上皮的底层细胞中。

著录项

作者
裴涌;
展开▼
作者单位

中国医科大学;

展开▼
授予单位中国医科大学;
学科眼科学
授予学位硕士
导师姓名洪晶;
年度 2006
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类眼附属器官疾病;
关键词
干细胞; 结膜上皮; 免疫组化; 细胞角蛋白;

相似文献

中文文献
外文文献
专利

1. 成人结膜干细胞定位特征的免疫组织化学研究 [J] . 裴涌 ,洪晶 ,张昊 . 国际眼科杂志 . 2010,第005期
2. 层粘连蛋白Ⅳ型胶原在人羊膜结膜基底膜分布的免疫组织化学研究 [J] . 柯碧莲 ,张皙 ,邱孝芝 . 眼科新进展 . 2002,第006期
3. 切除结膜结合淋巴组织鸡对新城疫疫苗点眼免疫反应Ⅱ.组织学与免疫组织化学研究 [J] . 孙斌 ,陈艳 ,孙运刚 . 中国兽医杂志 . 2002,第008期
4. 大鼠胚胎期及出生早期乳腺干细胞的免疫组织化学研究 [J] . 范凌云 ,安靓 ,李进 . 山东医药 . 2007,第020期
5. 脊髓源性神经干细胞分化过程的免疫组织化学研究 [J] . 李花 ,石玉秀 . 中国组织化学与细胞化学杂志 . 2004,第002期
6. 放疗后子宫颈鳞状上皮癌的组织病理学和免疫组织化学研究 [C] . 李奕 . 第二届中国女医师大会 . 2012
7. 大鼠乳腺干细胞形态学和免疫组织化学研究 [A] . 许俊良 . 2006

成人结膜干细胞定位的免疫组织化学研究

目录

摘要

著录项

相似文献

相关主题

期刊订阅