禽呼肠孤病毒S3、S4基因的克隆与序列分析

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1引言

1.1禽呼肠孤病毒感染概述

1.2病原学

1.2.1分类、形态与特性

1.2.2化学组成

1.2.3抗原性

1.2.4培养特性

1.2.5致病性

1.2.6抵抗力

1.2.8病毒基因组及编码蛋白质的功能

1.3流行病学

1.3.1易感动物

1.3.2传染源

1.3.3传播途径

1.4临床症状

1.5病理变化

1.6诊断

1.6.1临床诊断

1.6.2病理剖检

1.6.3实验室诊断

1.7防治

1.7.1疫苗的研究

1.7.2免疫

1.8本论文研究依据及意义

2材料与方法

2.1材料

2.1.1试验用病毒株

2.1.2参考毒株序列

2.1.3菌株及质粒

2.1.4主要试剂以及试剂盒

2.1.5试验所用溶液及其配制

2.1.6主要仪器设备

2.2方法

2.2.1引物的设计与合成

2.2.2病毒RNA的提取

2.2.3病毒目的基因的一步法RT-PCR扩增

2.2.4病毒目的基因的克隆

2.2.5质粒DNA测序

2.2.6基因序列拼接

2.2.7序列比较分析

3结果

3.1病毒目的基因的一步法RT-PCR扩增结果

3.1.1 S3基因的一步法RT-PCR扩增结果

3.1.2 S4基因的一步法RT-PCR扩增结果

3.2重组质粒的PCR鉴定结果

3.2.1 S3基因的重组质粒的PCR鉴定结果

3.2.2 S4基因的重组质粒的PCR鉴定结果

3.3序列的测定结果

3.3.1 S3基因序列测定结果

3.3.2 S4基因序列测定结果

3.4序列分析结果

3.4.1 S3基因序列分析结果

3.4.2 S4基因序列分析结果

4讨论

5结论

致谢

参考文献

附录

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