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龙葵(Solanum nigrum L.)细胞毒活性成分的继续研究和药材的质量控制研究

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摘要

前言

第一章 龙葵的细胞毒活性成分研究

1.1龙葵的细胞毒活性筛选

1.1.1MTS法原理

1.1.2细胞毒活性测试

1.1.3小结

1.2龙葵中化学成分的继椟分离研究

1.2.1龙葵果实部分的提取分离流程

1.2.2从果实部分分离得到的化合物列表

1.2.330%乙醇洗脱部分的提取分离流程

1.2.430%乙醇洗脱部分分离得到的化合物列表

1.3单体化合物的结构鉴定

1.4单体化合物细胞毒活性评价

1.5小结与讨论

第二章 龙葵药材的质量控制研究

2.1龙葵全草色谱指纺图谱的建立

2.1.1原料药材的收集

2.1.2色谱条件的优选

2.1.3供试品溶液的制备方法

2.1.4进样量的确定

2.1.5系统适用性考察

2.1.6样品的测定及龙葵药材液相色谱指纹图谱的建立

2.2药材细胞毒活性成分的含量测定

2.3不同采收季节对药材的影响

2.4小结与讨论

第三章 实验部分

第四章 小结与讨论

参考文献

附录

作者简历及发表论文情况

致谢

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摘要

本文利用MTS法对中药龙葵的不同部位和不同采收期的药材进行了细胞毒活性测试,发现龙葵的全草和果实具有较好的细胞毒活性,并随着植物生长周期的不同,药材的细胞毒活性呈现出一定的规律性变化。文中通过硅胶柱色谱、ODS柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱以及制备型反相HPLC等多种色谱学分离手段,对龙葵果实和全草(30%大孔树脂洗脱部分)的化学成分进行了研究,共分离得到并鉴定了14个化合物。 1.利用理化性质、现代波谱学(IR、MS、<'1>H-NMR、<'13>C-NMR和2D-NMR)以及化学沟通手段鉴定了它们的结构,分别为:oleic acid(1), linoleic acid(2),palmitic acid(3),β<,2>-solamargine(4),solamargine(5),degalactotigonin(6), uttroside B(7),syringaresinol-4-O-β-D-glucopyranoside(8),pinoresinol-4-O-β-D-glucopyran oside(9),6-methoxy-7-hydroxycoumarin(10),3,4-dihydroxybenzoicacid(11),p-hydroxybe nzoicacid(12),3-:methoxy4-hydroxybenzoic acid(13),adenosine(14)。其中,化合物8、9、14为首次从该属植物中分离得到。体外细胞毒活性测试表明1、2、5、6具有较好的细胞毒活性。 2.利用ELSD-HPLC(蒸发光检测器.高效液相色谱)技术对不同产地和不同采收期的(41批)龙葵药材进行了色谱指纹图谱研究。采用正交实验对样品制备方法进行了优化。并对色谱条件进行系统优选,使得到的色谱指纹谱图不但分离效果好而且信息量大。通过国家药典委颁布的色谱指纹图谱相似度评价软件对采集到的41批数据进行相似度评价,得到共有模式,建立起了参照指纹图谱,对其中的12个主要色谱峰进行了指认,建立了HPLC含量测定方法,对其中的5个主要体外细胞毒活性成份进行含量测定。将龙葵的细胞毒活性、指纹图谱的相似度、主要活性成分的含量三者相结合考察了不同采收期对龙葵药材内在质量的影响。

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