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淫羊藿总黄酮对喹啉酸诱导的人神经母细胞瘤细胞毒性的保护作用

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目的:探讨淫羊藿总黄酮(Total flavonoids of epimedium，TFE)对喹啉酸(Quinolinicacid，QA)诱导的人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞毒性的保护作用。
　　方法:QA对SH-SY5Y细胞的毒性作用:
　　将对数生长期的SH-SY5Y细胞分为:正常对照组、QA不同浓度组。0.5、1.0、2.5、5.0、10.0 mmol.L-1QA处理24h，四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞存活率。
　　TFE对QA诱导的SH-SY5Y细胞毒性的保护作用:
　　将对数生长期的SH-SY5Y细胞分为:正常对照组、溶剂对照组、QA模型组、TFE低、中、高浓度组。TFE低、中、高浓度组分别加入终浓度为0.125、0.25、0.50mg.L-1的TFE预处理24h，再与模型组同时加入终浓度为1 mmol.L-1QA继续培养24h。MTT法测定细胞存活率;Hoechst33258染色检测细胞凋亡;比色法测定超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase，SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase，GSH-Px)的活性和丙二醛(Malondialdehyde，MDA)含量;流式细胞仪(Flow cytometry，FCM)检测线粒体膜电位(Mitochondrial membrane potential，△Ψm)和细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)。
　　结果:QA对SH-SY5Y细胞的毒性作用结果:
　　MTT活性测定，随着QA浓度的增加，细胞活性逐渐下降，当QA为1 mmol.L-1及以上浓度时，细胞活性开始明显下降(P＜0.01)。
　　TFE对QA诱导的SH-SY5Y细胞毒性的保护作用结果:
　　MTT法检测，与正常组比较，模型组细胞存活率显著降低（P＜0.01）;与模型组和0.125 mg.L-1TFE组细胞存活率比较，0.25、0.50 mg.L-1的TFE组细胞存活率显著升高(P＜0.01);Hoechst33258染色检测结果，与正常组比较，模型组细胞呈现细胞核聚集浓缩、致密浓染的凋亡细胞增加;与模型组和0.125 mg.L-1TFE组比较，0.25、0.50 mg.L-1的TFE组呈现细胞核聚集浓缩、致密浓染的凋亡细胞减少;比色法检测结果，与正常组比较，模型组细胞SOD和GSH-Px活性显著降低，MDA含量显著升高;与模型组和0.125 mg.L-1TFE组比较，0.25、0.50mg.L-1的TFE组SOD和GSH-Px活性显著提高(P＜0.01)，MDA含量显著降低(P＜0.01);FCM结果显示，与正常组比较，模型组细胞△Ψm显著降低，[Ca2+]i显著升高;与模型组和0.125 mg.L-1TFE组比较，0.25、0.50mg.L-1的TFE组细胞△Ψm显著升高(P＜0.01)，[Ca2+]i显著降低(P＜0.01)。
　　结论:QA对体外培养的SH-SY5Y细胞有毒性作用，TFE对QA诱导的SH-SY5Y细胞毒性有保护作用，减少SH-SY5Y细胞的凋亡，其机制可能与抗氧化，降低[Ca2+]i水平，进而稳定线粒体膜电位有关。

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