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M受体与紧密连接在缺血预处理对移植下颌下腺保护机制中作用的研究

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摘要

符号说明

前言

材料与方法

一．实验动物

二．主要试剂及仪器设备

三．实验方法

实验结果

1．缺血再灌注及缺血预处理后大鼠下颌下腺分泌功能的改变

2．缺血再灌注及缺血预处理后大鼠下颌下腺组织形态学的变化

3．通过透射电子显微镜观察I／R组与IPC组对紧密连接超微结构的影响

4．缺血再灌注及缺血预处理后大鼠下颌下腺组织中M1、M3的改变

讨论

结论

附图

参考文献

致谢

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摘要

目的:
　　角结膜干燥症，是指任何原因引发的泪液质和量或动力学异样而致使泪膜稳定性降低，造成眼表损害和眼部不适症状的一类疾病，严重影响患者的生活质量。常见的相对保守治疗方法如人工泪液、泪道栓塞、泪点封闭等，用于治疗轻、中度角结膜干燥症的患者会起到一定的疗效，但这些方法对于患有重症角结膜干燥症患者的治疗效果通常不明显。近年来，随着显微外科技术的发展，通过外科手术行血管化自体下颌下腺移植，使用泪液替代品（即下颌下腺分泌的唾液）来发挥其功能，已逐渐应用于临床实践。
　　采用血管化自体下颌下腺移植治疗重症干眼病患者，其治疗过程需经历两个重要变化，即失去神经支配和缺血再灌注，并且两者对于移植后腺体的分泌功能均有影响。研究结果显示移植的下颌下腺腺体早期分泌功能低下主要是由于腺体失去交感和副交感神经支配而使神经递质的分泌降低，进而抑制了下游自主神经受体信号转导通路而导致分泌功能障碍。同时，缺血再灌注引起腺体组织的损伤-应激反应，也是影响腺体分泌功能的重要原因。大量研究证实，在缺血再灌注前行有效的预处理方案可以明显减轻组织的损伤-应激反应。旁细胞途径是下颌下腺水转运的主要方式，而紧密连接结构是旁细胞途径的重要结构，对于腺体分泌的功能起着重要作用。
　　为进一步研究缺血预处理在血管化自体下颌下腺移植治疗重症干眼病中腺体的保护作用，本实验通过建立大鼠下颌下腺原位缺血再灌注及缺血预处理模型，研究在缺血预处理对缺血再灌注大鼠下颌下腺保护过程中M受体与紧密连接的改变。
　　方法:
　　建立大鼠下颌下腺原位缺血再灌注及缺血预处理模型，以经历90min缺血的下颌下腺作为I/R组，在缺血前通过夹闭颌外动脉下颌下腺供血支3min，然后开放血管夹进行再灌注3min，重复3次的下颌下腺为IPC组，对侧下颌下腺作为对照组。在恢复血供分别再灌注1h、12h、24h、72h后检测各组腺体分泌量、组织学变化、紧密连接结构变化及M受体水平情况。
　　结果:
　　在经历缺血再灌注后，大鼠下颌下腺腺体分泌在1h和12h明显减少，至72h逐渐恢复正常。组织学表现为腺实质细胞出现萎缩，间质出现水肿及炎症浸润;电镜下超微结构观察显示紧密连接结构破坏，宽度降低，均在再灌注12h后最为严重。M受体水平也呈相应的变化，在再灌注12h后下调明显，72h时逐渐恢复。而缺血预处理能一定程度的改善上述变化。
　　结论:
　　缺血再灌注会导致大鼠下颌下腺M受体下降，破坏紧密连接结构，损伤腺体，影响下颌下腺的分泌功能，缺血预处理可以通过调控M受体及紧密连接结构对移植下颌下腺起到有效的保护。

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