慢性进行性眼外肌麻痹及Kearns-Sayre综合征患者线粒体DNA突变的研究

代理获取

页面导航

目录
摘要
著录项
相似文献
相关主题

摘要

目的：近年来，人们在线粒体呼吸链缺乏而引起的疾病，特别是CPEO的患者的肌肉组织和其他多种组织中发现有大片段的线粒体DNA缺失。许多研究表明这些缺失是这类疾病的重要病因。本实验将检测11例慢性进行性眼外肌麻痹及Kearns-Sayre综合征患者骨骼肌细胞的线粒体DNA的缺失情况。方法：从11例慢性进行性眼外肌麻痹和Kearns—Sayre综合征患者的骨骼肌活检标本中，提取总体DNA。根据限制性内切酶PvuⅡ使用说明，取1μgDNA，加入2个单位的酶，37℃下，在终体积为20μl的反应体系中消化1小时(酶切位点在2654)，使DNA线性化。将DNA片段加入浓度为0.8％的琼脂糖凝胶中，与入-Hind Ⅲ digest marker同时电泳，至marker移至胶的中部停止电泳，使DNA片段按大小分离。将琼脂糖凝胶在0.2M HCl中浸泡8min使DNA脱嘌呤，然后浸入变性液中浸泡2×15min使DNA变性，再浸入中和液中浸泡2×15min使之中和。使用20×SSC转移液，采用毛细转移法将凝胶上的DNA转移至正电荷尼龙膜上。使用线粒体/胞质病毒。DNA纯化试剂盒从正常人全血中提取全长线粒体DNA作为探针，使用地高辛高效标记与检测试剂盒进行地高辛-dUTP标记，并与正电荷尼龙膜进行预杂交、杂交、杂交后冲洗及显色反应。结果：正常对照的标本只出现一条16.5kb的杂交带。ll例CPEO及KSS患者在16.5kb处也均有一条杂交带。有7例患者除一条正常大小杂交带外，还有一条异常的缺失型线粒体DNA杂交带。出现缺失型线粒体DNA的患者占总数的64％。剂量分析表明缺失型线粒体DNA占总线粒体DNA的50～75％。缺失片断大小在4.5～5.5kb之间。结论：CPEO及KSS患者骨骼肌线粒体DNA缺失率较高，线粒体DNA基因缺失是线粒体疾病的重要病因之一。

著录项

作者
孙明;
展开▼
作者单位

山东大学;

展开▼
授予单位山东大学;
学科眼科学
授予学位硕士
导师姓名张林娜;
年度 2006
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类眼肌疾病与斜视;
关键词
线粒体脑肌病; 慢性进行性眼外肌麻痹; Kearns-Sayre综合征; 线粒体DNA; 突变分析;

相似文献

中文文献
外文文献
专利

1. 慢性进行性眼外肌麻痹及Kearns-Sayre综合征患者线粒体DNA突变的研究 [J] . 田旭 ,孙明 ,张爽 . 山东大学耳鼻喉眼学报 . 2006,第4期
2. 慢性进行性眼外肌麻痹-线粒体脑肌病CEPO型1例报告 [J] . 杨林 ,朱丹 ,孙鹏 . 中风与神经疾病杂志 . 2012,第002期
3. 慢性进行性眼外肌麻痹1例线粒体遗传突变分析 [J] . 童绎 ,杨薇 ,刘斌 . 中国中医眼科杂志 . 2010,第001期
4. 慢性进行性眼外肌麻痹与线粒体DNA缺失的关系 [J] . 王文勇 ,张金环 . 承德医学院学报 . 1999,第003期
5. 伴多线粒体DNA缺失的散发性进行性眼外肌麻痹患者很少发生POLG1、C10ORF2和ANT1突变 [J] . Hudson G. ,Deschauer M. ,Taylor R.W. . 世界核心医学期刊文摘：神经病学分册 . 2006,第9期
6. 慢性进行性眼外肌麻痹1例线粒体遗传突变分析 [C] . 童绎 ,杨薇 ,刘斌 . 福州市科协2010年学术年会 . 2010
7. 慢性进行性眼外肌麻痹患者上睑下垂的手术治疗 [A] . 周雪维 . 2016

慢性进行性眼外肌麻痹及Kearns-Sayre综合征患者线粒体DNA突变的研究

目录

摘要

著录项

相似文献

相关主题

期刊订阅