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延胡索乙素对肉鸡单个心室肌细胞动作电位及钾离子通道的影响

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论文说明:图表目录、缩略语表

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1引言

1.1膜钳技术研究进展

1.1.1膜片钳技术的特点与基本原理

1.1.2膜片钳的几种形式

1.1.3膜片钳技术的新进展

1.1.4膜片钳技术的应用

1.2离子通道研究进展

1.2.1钠离子通道

1.2.2钙离子通道

1.2.3钾离子通道

1.3延胡索乙素研究进展

1.3.1延胡索乙素简介:

1.3.2 d1-THP对心血管的作用

1.3.3 d1-THP的药物动力学

1.3.4 d1-THP的应用前景

2试验材料与方法

2.1试验材料

2.1.1实验动物

2.1.2主要仪器

2.1.3药品与试剂以及给药方法

2.2实验方法

2.2.1肉鸡心室肌细胞的急性分离

2.2.2电生理记录

2.2.3全细胞电流钳(current clamp)方法记录动作电位

2.2.4数据的采集和分析

2.2.5数据的统计学处理

3实验结果

3.1肉鸡心室肌细胞的形态学特征

3.2延胡索乙素对心室肌细胞动作电位的影响

3.3延胡索乙素对肉鸡心室肌细胞钾电流的影响

3.3.1 d1THP对肉鸡心室肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)的作用

3.3.2 d1-THP对肉鸡心室肌细胞延迟整流钾电流(Ik)的作用

4讨论

4.1心肌细胞的分离

4.2延胡索乙素(dI-THP)的应用

4.2.1延胡索乙素对心肌细胞动作电位的影响

4.2.2延胡索乙素对Ik的影响

4.2.3延胡索乙素对Ito的影响

5结论

6创新点

7局限性

参考文献

致谢

作者简介

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摘要

本实验研究延胡索乙素(dl-THP)对肉仔鸡心室肌细胞动作电位、钾离子通道的影响,利用已有的延胡索乙素的抗心律失常机理,为探讨肉鸡猝死综合征的发病机理做一些理论铺垫。实验过程中采用酶解法分离肉仔鸡单个心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术记录延胡索乙素对肉仔鸡单个心室肌细胞动作电位(AP)、延迟整流钾电流(I<,k>)及瞬时外向钾电流(It0)的影响。实验发现: (1)0.1μM/L、1μM/L、10μM/L延胡索乙素,用药前后对肉仔鸡单个心室肌细胞动作电位幅度、静息电位(RP)无影响,但可使APD90呈浓度依赖性延长。10μM/Ldl-THP使动作电位复极50%时程(APD<,50>)和电位复极90%时程(APD<,90>)分别由(90.00±16.73)Ins、(133.00±17.37)ms延长为(143.83±22.13)ms和(278.17±48.24)ms(n=6); (2)dl-THP能够明显抑制延迟整流钾电流(I<,k>),在+50mV脉冲刺激下,应用1μM/L,10μM/L dl-THP后,I<,k>峰值电流从给药前(1.50±0.14)nA下降至(1.29±0.14)nA(n=10),(1.13±0.10)hA(n=10),冲洗后不恢复; (3)dl-THP对瞬时外向钾电流(Ito)无明显影响。结果显示:dl-THP通过抑制肉鸡延迟整流钾电流(I<,k>)延长心室肌细胞APD,相对延长细胞有效不应期,提高动作电位阈值,从反面推断钾离子通道可能与SDS发病机制有关,具体机制须进一步研究。

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