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Cx43在小鼠卵巢中的表达及黄体生成素和双氢睾酮对小鼠卵巢和大鼠颗粒细胞Cx43表达的影响

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中英文缩略词对照

前言

材料与方法

一、实验材料

二、实验方法

结果

一、Cx43在小鼠卵巢中的表达

二、LH和DHT对卵巢组织Cx43表达的影响

三、LH和DHT对颗粒细胞Cx43表达的影响

讨论

1.Cx43在小鼠卵巢中的表达

2.LH体外干预可促进小鼠卵巢Cx43的表达

3.DHT体外干预可促进小鼠卵巢Cx43的表达

4.LH和DHT诱导原代颗粒细胞Cx43表达的信号通路

结论

参考文献

文献综述:Connexin43在雌性生殖系统中的研究进展

致谢

攻读学位期间发表的学术论文

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摘要

缝隙连接蛋白43(Connexin43,Cx43)是哺乳动物卵巢卵泡颗粒细胞间表达最多的一种缝隙连接蛋白,在卵泡发育、卵母细胞生长等环节中发挥重要作用。卵泡颗粒细胞Cx43的表达受促性腺激素的调节,已经发现卵泡刺激素(Follicle stimulating hormone,FSH)可促进发育卵泡颗粒细胞Cx43的表达,加强颗粒细胞之间的缝隙连接。黄体生成素(Luteinizing hormone,LH)是否具有促进Cx43表达的作用以及具体的作用机理,尚未明确。此外,雄激素在卵泡发育和女性生育调节过程中同样发挥重要作用,而雄激素对颗粒细胞Cx43表达的影响亦不明确。本研究以不同发育阶段的雌性C57小鼠和卵巢以及原代培养的大鼠颗粒细胞为材料,应用形态学,细胞生物学和分子生物学方法,研究小鼠生长发育过程中卵巢Cx43表达的模式,以及LH和双氢睾酮(Dihydrotestosterone,DHT)对小鼠卵巢和大鼠颗粒细胞Cx43表达的影响及可能的机理。
  实验结果显示,在小鼠卵巢中,Cx43表达于卵巢颗粒细胞胞膜上,LHR表达在卵泡膜细胞、颗粒细胞及卵母细胞胞质中。随卵泡发育,颗粒细胞数量的增加,Cx43及LHR的表达明显增强。使用不同浓度的LH及DHT体外孵育小鼠卵巢,发现LH及DHT均可促进小鼠卵巢Cx43的表达。
  对于原代培养21d大鼠颗粒细胞,Cx43表达于颗粒细胞胞质和部分细胞膜上。LH和Wnt/β-catenin信号通路激动剂LiCl均可增加颗粒细胞Cx43的表达,而使用Wnt/β-catenin信号通路抑制剂FH535,可减少LH诱导的Cx43表达。同样,使用DHT和Wnt/β-catenin信号通路激动剂LiCl均可增加颗粒细胞Cx43的表达,使用Wnt/β-catenin信号通路抑制剂FH535后,可减少DHT诱导的Cx43表达。
  综上所述,我们得到如下结论:
  (1)小鼠自然生长状态下,随卵泡发育,颗粒细胞数量增加,Cx43及LHR表达明显增强;LH可能通过LHR调控卵泡颗粒细胞Cx43的表达。
  (2)适合浓度LH和DHT体外干预小鼠卵巢组织,可促进卵泡颗粒细胞Cx43表达,说明LH和DHT是Cx43表达的调控因素。
  (3)LH和DHT均可通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进颗粒细胞Cx43表达。

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