两种来源人胎盘间充质干细胞CD200的差异表达对小鼠皮肤移植免疫调节作用的研究

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目的：研究两种来源的人胎盘间充质干细胞 CD200的表达差异在小鼠皮肤移植免疫调节中的作用及作用机制，为临床上选择更好的抑制免疫排斥的干细胞提供一定理论依据。
　　方法：分离两种来源细胞；流式细胞术检测间充质干细胞表面标志分子等的表达情况；流式细胞抗体中和高表达CD200分子的细胞、携带CD200基因的腺病毒载体及腺病毒空载体分别转染低表达CD200分子的细胞，将等量PBS及上述处理过的细胞通过尾静脉注射入将ICR乳鼠皮肤移植至C57BL/6背部建立的皮肤移植免疫排斥模型小鼠体内，统计各组皮肤存活时间；术后第7天，HE染色法观察小鼠移植部位炎性细胞浸润情况；RT-PCR法检测小鼠脾脏中IL-17、IFN-γ、TNF-α、IL-10基因的相对表达量；眼眶静脉取血，检测各组小鼠血液中白细胞的含量；ELISA法检测血液中相应免疫因子的含量。
　　结果：胎儿侧来源细胞 CD200阳性率明显高于母体侧。与 PBS组比较：mPMSC组和fPMSC组移植皮肤存活时间均明显延长；与fPMSC+anti-CD200组比较：fPMSC组移植皮肤存活时间明显延长；与mPMSC+腺病毒空载体组比较：mPMSC+CD200腺病毒组移植皮肤存活时间明显延长。HE结果显示：细胞移植组炎性细胞的浸润数量明显少于PBS组。RT-PCR结果显示：与PBS组比较：mPMSC组IL-17、IFN-γ、TNF-α的相对表达量，fPMSC组TNF-α的相对表达量明显降低，fPMSC组IL-10的相对表达量明显升高；与mPMSC组比较：fPMSC组IFN-γ、TNF-α的相对表达量均明显降低；与 fPMSC组比较：fPMSC+Anti-CD200组 IL-17、TNF-α的相对表达量，fPMSC+Anti-CD200组IFN-γ的相对表达量均明显升高；与mPMSC+CD200腺病毒载体转染组比较：mPMSC+腺病毒空载体转染组TNF-α、IFN-γ的相对表达量均明显升高，mPMSC+腺病毒空载体转染组 IL-17的相对表达量明显升高，mPMSC+腺病毒空载体转染组IL-10的相对表达量明显降低。ELISA结果与RT-PCR结果相符。
　　结论： fPMSC抑制小鼠皮肤移植免疫排斥作用优于mPMSC；与其更强的抑制免疫细胞的增殖、分化以及成熟，从而更有效的调节免疫因子IL-17、IFN-γ、TNF-α、IL-10等的分泌有关；fPMSC更适于临床上作为抑制皮肤移植免疫排斥的种子细胞。

著录项

作者
郝贵亮;
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作者单位

宁夏医科大学;

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授予单位宁夏医科大学;
学科临床检验诊断学
授予学位硕士
导师姓名李玉奎;
年度 2015
页码
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原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类 R622.1;
关键词
胎盘间充质干细胞; 皮肤移植; 免疫调节; 动物模型; 作用机制;

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