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淡水溺死后大鼠肺组织和血清中IL-1α、IL-1β和IL-13 mRNA的表达变化

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前言

1材料与方法

1.1 主要试剂与仪器

1.2 研究对象

1.2.2 人体肺组织检材

1.3 动物模型制备

1.3.1 实验动物分组

1.3.2 动物模型的复制

1.3.3 检材处理

1.4 实验方法

1.4.1 肺组织IL-1α、IL-1β及IL-13mRNA的提取

1.4.2 右心室血清IL-1α、IL-1β和IL-13mRNA的提取

1.4.3 引物、探针设计与合成

1.4.4 一步法实时荧光定量PCR

1.5 统计学处理

2 结 果

2.1 大鼠死后征象及解剖所见

2.2 病理形态学改变

2.3 大鼠肺组织IL-1α、IL-1β及IL-13mRNA表达检测

2.4大鼠右心室血清中IL-1α、IL-1β及IL-13mRNA表达变化

2.5 人肺组织IL-1α、IL-1β及IL-13 mRNA表达检测

3讨 论

4结 论

参考文献

综述:与急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征相关的生物学指标

附表1 所收集尸体的具体信息

致谢

个人简介

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摘要

目的:
  建立溺死动物模型检测大鼠肺组织和血清中以及人肺组织的IL-1α、IL-1β和1L-13 mRNA的表达变化,探讨IL-1α、IL-1β和IL-13 mRNA在鉴别溺死的潜在价值。
  方法:
  24只SD大鼠随机分为典型溺死组和对照组。对照组分为溺水应激组、心肌梗死组和空白对照组3个亚组,每组均6只。将典型溺死组动物放入常温自来水中溺死;溺水应激组大鼠放入水中待其第一次呛水时立即取出颈椎脱臼处死;心肌梗死组大鼠注射异丙肾上腺素制作心肌梗死动物模型,6天后颈椎脱臼处死;空白对照组大鼠直接颈椎脱臼处死。大鼠死亡后分别收集各组大鼠右心室血清及右侧肺下叶、左侧肺叶及心肌组织。应用HE染色法对左侧肺叶、心肌进行组织学观察;应用TaqMan探针法检测右侧肺下叶及右心室血清IL-1α、IL-1β、IL-13 mRNA表达水平。收集溺死尸体肺组织标本,其中溺死组(n=5);对照组(n=2),使用TaqMan探针法检测肺组织中IL-1α、IL-1β和IL-13 mRNA表达水平。
  结果:
  1.大体解剖及病理组织学改变。大鼠大体解剖征象:典型溺死组体表及解剖征象符合生前溺死征象。溺水应激组、空白对照组及心肌梗死组大鼠气管及左右主支气管未见泡沫样液体,切面无溺液流出。各组大鼠肺组织HE染色观察见:溺死组可见弥漫性肺气肿,肺泡腔扩张,肺泡壁变薄、断裂,其肺气肿程度明显高于其他三组,未见明显的水性肺气肿。余各组肺组织未见异常。各组大鼠心肌组织病理学变化:心肌梗死组大鼠心肌HE染色可见大鼠心肌细胞肿胀明显,部分心肌细胞排列紊乱,心肌间质内可见大量炎症细胞浸润,纤维组织增生,表明心肌梗死模型制作成功。其余各组心肌未见明显异常。
  2.大鼠肺组织IL-1α、IL-1β及IL-13 mRNA表达检测。
  (1)单因素方差分析显示,与空白对照组、溺水应激组及心肌梗死组比较,溺死组大鼠肺组织IL-1α、IL-1β及IL-13 mRNA表达无显著变化。
  (2)其他各对照组之间比较,IL-1α、IL-1β及 IL-13 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。
  3.大鼠右心室血清IL-1α、IL-1β及IL-13 mRNA表达检测。
  (1)与空白对照组比较,溺死组大鼠IL-1β、IL-13 mRNA表达显著升高(P<0.01)。
  (2)与心肌梗死组比较,溺死组大鼠IL-1β及IL-13 mRNA表达亦明显升高(P<0.05)。
  (3)与溺水应激组比较,溺死组大鼠IL-1α、IL-1β及IL-13 mRNA表达均显著升高(P<0.01)。
  (4)溺水应激组与空白对照组比较,其血清IL-1β及IL-13 mRNA表达略降低,IL-1α表达显著降低(P<0.01),与心肌梗死组比较,表达均未见明显改变(P>0.05);心肌梗死组与空白对照组比较,血清IL-1α、IL-1β及IL-13 mRNA表达均无明显变化(P>0.05)。
  (5)Pearson相关性分析结果:溺死组大鼠血清中IL-13与IL-1β存在显著正相关性(P值为0.006,R值为0.938)。
  4.人肺组织中IL-1α、IL-1β及IL-13 mRNA表达变化。与对照组比较,溺死组肺组织IL-1α相对表达量为0.71倍,IL-1β相对表达量为2.73倍,IL-13相对表达量为1.06倍。
  结论:
  IL-1β及IL-13 mRNA在溺死后大鼠右心室血清中表达量均有显著升高,并存在显著正相关性,联合检测血清中IL-1β和IL-13有可能鉴别生前溺死。

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