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一氧化氮和烟碱型乙酰胆碱受体在大鼠学习记忆中的联合作用

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摘要

中英文缩略词表

前言

材料与方法

1 材料

2 方法

实验结果

1 大鼠Y-迷宫学习和记忆行为能力检测结果

2 大鼠海马α7nAChR-LI或nNOS-LI的表达

3 Western-blot检测结果

4 大鼠海马组织NO含量

讨论

结论

参考文献

附录

综述 一氧化氮与烟碱型乙酰胆碱受体在学习记忆中的的相互作用研究进展

个人简历

致谢

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摘要

目的：探讨一氧化氮(nitric oxide，NO)和烟碱型乙酰胆碱受体在大鼠学习记忆过程中的相互作用。 方法：将大鼠给予侧脑室注射NO前体左旋精氨酸（L-arginine，L-Arg）（L-Arg组）或α7烟碱型乙酰胆碱受体α7 nicotinic acetylcholine receptor，α7nAChR)的激动剂氯化胆碱（choline chloride，CC）（CC组），以及联合注射L-Arg和CC(L-Arg+CC组)，和先给α7nAChR拮抗剂甲基牛扁亭(methyllycaconitine，MLA)再联合注射L-Arg和CC（MLA+L-Arg+CC组）、先给一氧化氮合酶抑制剂Nω-硝基-L-精氨酸甲酯（Nω-nitro-L-arginine methylester，L-NAME）再联合注射L-Arg和CC（L-NAME+L-Arg+CC组），侧脑室注射生理盐水(NS组)作为对照。30 min后，用Y型迷宫刺激器检测大鼠的学习行为能力，24 h后检测大鼠的记忆能力;用NO试剂盒和免疫组织化学及Western Blot分别检测大鼠海马NO含量和α7nAChR及神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthetase，nNOS)的表达。 结果： 1）Y迷宫学习过程中达到标准所需的测试次数和24中英文统一后30次记忆测试中的错误反应次数:在L-Arg组或CC组与NS组比较均减少（L-Arg组26.90±3.90 vs47.20±6.55，7.50±2.59 vs12..90±4.90，和CC组24.80±7.36 vs47.20±6.55，7.30±2.21vs12..90±4.90，均为P＜0.01）;L-Arg+CC组则与L-Arg组比较(18.40±3.77 vs26.90±3.90，P＜0.01;4.10±1.37 vs7.50±2.59，P＜0.05)或与CC组比较（18.40±3.77 vs24.80±7.36，4.10±1.37 vs7.30±2.21，均为P＜0.05）均减少;MLA+L-Arg+CC组（22.1±3.21 vs18.40±3.77，5.9±1.85 vs4.10±1.37，均为P＜0.05）或L-NAME+L-Arg+CC组（21.6±3.24 vs18.40±3.77，6.1±2.18 vs4.10±1.37，均为P＜0.05）与L-Arg+CC组比较则均增多，而二者均分别较L-Arg组或CC组减少（均为P＜0.05或P＜0.01）。 2)海马组织中NO含量:在L-Arg组或CC组与NS组比较均增多（L-Arg组为2.45±0.49 vs1.58±0.08，CC组为2.62±0.38 vs1.58±0.08，二者均为P＜0.01）;L-Arg+CC组则较L-Arg组（3.12±0.58 vs2.45±0.49，P＜0.01）或CC组(3.12±0.58 vs2.62±0.38，P＜0.05)增多;MLA+L-Arg+CC组（2.90±0.40 vs3.12±0.58，P＜0.05）或L-NAME+L-Arg+CC组（2.81±0.26 vs3.12±0.58，P＜0.05）与L-Arg+CC组比较则均减少，而二者则均分别较L-Arg组或CC组增多（均为P＜0.05）。 3)海马CA1区、CA3区、DG区α7nAChR-LI表达的IOD值:在L-Arg组或CC组与NS组比较均增多（L-Arg组分别为34.40±8.64 vs19.00±6.23，39.9±12.84 vs20.39±6.74，11.51±1.54 vs6.11±1.14，P＜0.05或P＜0.01;CC组分别为43.81±9.49 vs19.00±6.23，32.47±5.41 vs20.39±6.74，14.54±6.06 vs6.11±1.14，P＜0.05或P＜0.01）;L-Arg+CC组与L-Arg组比较（66.25±22.52 vs34.40±8.64，56.13±13.55 vs39.9±12.84，21.57±6.50vs11.51±1.54，P＜0.05或P＜0.01）或与CC组比较（66.25±22.52 vs43.81±9.49，56.13±13.55 vs32.47±5.41;21.57±6.50 vs14.54±6.06，P＜0.05或P＜0.01）均增多;MLA+L-Arg+CC组（50.41±9.08 vs66.25±22.52，46.43±5.17 vs56.13±13.55，16.63±5.33vs21.57±6.50，P＜0.05或P＜0.01）或L-NAME+L-Arg+CC组（52.62±10.26 vs66.25±22.52，49.91±12.01 vs56.13±13.55，17.88±3.47 vs21.57±6.50，P＜0.05或P＜0.01）与L-Arg+CC组比较则均减少，而二者则均分别较L-Arg组或CC组增多（P＜0.05和P＜0.01）。Western Blot检测结果也呈现一致性变化。 4)海马CA1区、CA3区、DG区nNOS-LI表达的IOD值:在L-Arg组或CC组与NS组比较均增多（L-Arg组分别为2.84±0.53vs1.47±0.49，2.18±0.47 vs0.70±0.33，1.89±0.51vs0.75±0.33，P＜0.05或P＜0.01;CC组分别为3.13±0.73 vs1.47±0.49，2.01±0.71vs0.70±0.33，2.19±0.51 vs0.75±0.33，P＜0.05或P＜0.01）;L-Arg+CC组与L-Arg组比较（6.42±1.49 vs2.84±0.53，3.21±0.67 vs2.18±0.47，4.85±1.60vs1.89±0.51，P＜0.01）或与CC组比较（6.42±1.49 vs3.13±0.73，3.21±0.67vs2.01±0.71，4.85±1.60 vs2.19±0.51，P＜0.05或P＜0.01）均增多;MLA+L-Arg+CC组（5.34±0.97vs6.42±1.49，2.76±0.62 vs3.21±0.67，3.76±0.33vs4.85±1.60，P＜0.05）或L-NAME+L-Arg+CC组（4.93±0.73vs6.42±1.49，2.46±0.35 vs3.21±0.67，3.60±0.49 vs4.85±1.60，P＜0.05或P＜0.01）与L-Arg+CC组比较则均减少，而二者则均分别较L-Arg组或CC组增多(P＜0.05和P＜0.01)。Western Blot检测结果也呈现一致性变化。 结论：以上结果表明侧脑室联合应用L-Arg和氯化胆碱可明显提高其单独应用时对大鼠海马NO含量及nNOS和α7nAChR表达及其对大鼠学习和记忆行为能力的增强效应;而提前阻断α7nAChR或抑制nNOS后，其联合应用L-Arg和CC的效应也得到了抑制。因此推测，NO和烟碱受体在学习记忆中可能存在着相互协同作用。

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