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舒芬太尼对2型糖尿病大鼠离体胸主动脉血管内皮的影响

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摘要

前言

第一章 材料与方法

1．1 主要试剂和仪器

1．2 实验动物选取

1．3 实验方法

1．4 统计学处理

第二章 结果

2．1 大鼠离体胸主动脉对NE的收缩反应及NO、NOS表达

2．2 不同浓度舒芬太尼对正常大鼠离体血管环收缩功能及NO、NOS表达影响

2．3 不同浓度舒芬太尼对糖尿病大鼠离体血管环收缩功能及NO、NOS表达的影响

2．4 高浓度舒芬太尼对大鼠血管环张力、NO及NOS的影响

第三章 讨论

第四章 结论

参考文献

综述 舒芬太尼对不同群体心血管系统的研究现状

个人简历

致谢

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摘要

目的观察正常与糖尿病大鼠离体胸主动脉血管环对不同浓度舒芬太尼的直接作用反应及相关机制 方法选取8周龄雄性健康Wistar大鼠16只，随机分出正常大鼠组(N，n=8)，以普通饲料喂养;糖尿病大鼠组(D，n=8)，高脂高糖喂养并经腹腔注射链脲佐菌素诱导成糖尿病。动物模型构建成功后，每只大鼠断头处死迅速分离胸主动脉剪成4段动脉血管环，小心剔除血管周围结缔组织，每段2-4mm长，并立即放入盛有K-H预冷营养液的血器皿中以维持血管环的活性，此营养液保证充足氧供持续通入95％O2+5％CO2混合气体，随后将4段血管环分别给予生理盐水C组、舒芬太尼低浓度7×10-11mol·L-1S1组、中浓度2×10-10mol·L-1S2组、高浓度1×10-9mol·L-1S3组处理，将血管环一端连接张力测量装置，另一端采用离体血管环灌流法在浴管中预孵，KCl具有收缩血管作用，先经KCL预收缩测得血管环平衡张力G1;而NE是强血管收缩药，经脱洗、平衡后给予不同浓度10-6、10-5、10-4、10-3mol·L-1NE（内皮依赖性缩血管物质）预孵测血管张力G2，比较前后变化幅度，计算G2/G1X100％来反映血管内皮舒张功能。随后采用ELISA酶联免疫法，对各组血管环组织进行研磨、离心取上清液，经氧化还原反应形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，在显色剂、过氧化物酶、酸作用下变色，在450nm波长下测定吸光度值(OD)，通过标准曲线计算大鼠血管环中NO、NOS表达水平。观察不同浓度舒芬太尼作用后对正常组32段血管环内皮NO、NOS的定量表达情况;取糖尿病组32段血管环在不同浓度舒芬太尼预孵下测定NO、NOS的表达;分别取正常与糖尿病组中高浓度舒芬太尼处理组血管环对NO、NOS表达进行分析比较，来反映对血管内皮的作用效果。 结果 (1)与NC相比，NS2、NS3血管环收缩幅度降低，组织匀浆NO、NOS表达升高（P＜0.05）; (2)与DC相比，DS1、DS2、DS3组血管环收缩幅度均降低，组织匀浆NO、NOS表达均升高（P＜0.05）;与DS1相比，DS2、DS3组血管环收缩幅度降低，组织NO、NOS表达升高;与DS2相比，DS3组血管环收缩幅度显著降低，组织NO、NOS表达显著升高(P＜0.01)。 (3)与DS3相比，NS3组血管环张力及NO、NOS表达与其有差别（P＜0.05）。 结论 不同浓度舒芬太尼对糖尿病大鼠离体胸主动脉血管环均有抑制收缩作用，高浓度作用更为显著，其机制可能与血管内皮因子NO表达升高有关，而NOS合酶是其生物转化的关键酶。

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