肌肉浸润性膀胱癌细胞系T-24导向肽筛选

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目的：膀胱癌已成为泌尿系统最常见的恶性肿瘤，其发病率逐年上升。虽然约80％的膀胱癌患者最初表现为非侵入性、浅表性癌，但其复发率仍然很高，甚至有些患者会发展成浸润性癌。根据国内外膀胱肿瘤的诊疗指南：膀胱镜检查及活检是最可靠的浅表性膀胱肿瘤的诊断方法，但膀胱镜观察的只是膀胱内部结构表面的一部分，并且光穿透膀胱组织时会在表面产生广泛散射、反射的现象，造成深部组织的模糊不清，同时对微小肿瘤的识别相对较弱。随着科技的不断进步，膀胱镜和电切镜已经做了一些改进，但Xishuang等认为TURBt术后肿瘤复发率没有显著减少。因此，要进一步探索特异性强、阳性率高、能识别微小肿瘤的诊疗手段成为广大临床医生的迫切需求。
　　光学分子影像学的诞生给了广大临床医生及泌尿系肿瘤的研究者带来了全新的视角。光学分子影像学（OpticalMolecularImaging）是在蛋白质组学、基因组学和现代光学影像技术的基础上发展起来的新兴研究领域。新型的光学分子影像技术依托于荧光或非可见光，通过向体内引入荧光物质或荧光报告基因可以检测到在组织表面之下，使显像深度更进一步，解决了传统的光学影像方法依托于可见光在穿透组织的过程中在组织的表面发生广泛的反射和散射现象，导致深层组织结构模糊不清，不能识别的难题，进一步应用于膀胱肿瘤的诊断以及术中指导，为降低微小肿瘤的漏诊率及肿瘤的复发率做出巨大贡献。本实验既题针对光学分子影像学基础理论之一的特异性小分子多肽作初步研究。在此之前Lee等采用噬菌体展示肽库技术筛选得到的膀胱癌特异性CSNRDARRC多肽，组织切片上该序列能够选择性与人类膀胱癌组织结合，并陆续取得了相应成果。本课题旨在研究筛选出浸润性膀胱癌细胞T-24特异性小分子多肽，为后续的临床诊断及治疗研究打下基础。
　　方法：本实验应用噬菌体肽库展示技术，选择浸润性膀胱癌细胞T-24为研究对象，入选标准为处于对数期生长的浸润性膀胱癌T-24细胞。我们利用噬菌体展示七肽库与性膀胱癌细胞T-24进行3轮全细胞筛选及扩增、纯化，分析筛选后单克隆对膀胱癌细胞的特异性结合能力。提取单克隆DNA并测序，得出多肽序列进行对比分析。
　　结果：经过3轮筛选后所随机挑选的20个单克隆均显示与膀胱癌细胞有较高的特异性结合，并测序得到三条重复性高的多肽序列(-SNARGTE-、-CSYCKNR-、-DSAYNCR-)。
　　结论：1.获得与T-24细胞特异性结合的导向肽；2.噬菌体与膀胱癌细胞结合时由于噬菌体表面的多肽而不是由于噬菌体本身；3.得到膀胱癌细胞T-24导向肽的DNA序列。

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作者
徐磊;
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作者单位

山西医科大学;

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授予单位山西医科大学;
学科泌尿外科
授予学位硕士
导师姓名杨晓峰;
年度 2012
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类膀胱肿瘤;
关键词
浸润性膀胱癌; T-24细胞; 导向肽; 噬菌体肽库展示; 肿瘤复发率;

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