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骨髓间充质干细胞移植对VCD所致卵巢损伤的影响

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文献回顾

一、卵巢早衰诊断及治疗

二、VCD 与卵巢早衰

三、卵泡的发生与调控

四、间充质干细胞研究进展

正 文

第一部分 MSCs 移植对小鼠卵巢损伤的影响

实验一 卵巢损伤模型的构建

实验二 MSCs 的体外扩增及移植

小结

讨论

参考文献

卵巢早衰治疗进展

参考文献

个人简历和研究成果

致谢

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摘要

目的:
  探讨小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对去氧乙烯基环己烯(VCD)所致卵巢损伤的影响。
  方法:
  采用VCD(160mgkg-1,day-1)连续腹腔注射来诱导小鼠卵巢早衰。每日8时行阴道脱落细胞检测,观察小鼠动情周期的变化,当出现10天或10天以上动情间期,视为模型建立。将实验小鼠分为两大组:VCD诱导的模型组以及佐剂对照组,将模型组进一步分为两组,一组用于MSCs移植,一组用PBS代替。于注药开始第100天给予每侧卵巢注射转染了绿色荧光蛋白的骨髓来源的MSCs,并分别于移植后2w、4w及6w天,取各组血液标本,酶联免疫法检测血清FSH、LH水平。收集移植后6w组小鼠卵巢,取新组织制作冰冻切片,显微镜下观察MSCs在卵巢的分布,免疫荧光检测生成类固醇激素细胞的表面标记。其余-80℃保存用于RNA提取。
  结果:
  病理切片示VCD处理后小鼠卵巢无明显卵泡,血清FSH及LH水平明显高于佐剂对照组。MSCs移植后4w开始细胞移植组小鼠血清FSH与LH水平较PBS对照组降低,移植组卵巢内可见绿色荧光信号,对照组卵巢未见到,其主要分布于卵巢间质区。取移植后6周小鼠卵巢进行免疫荧光检测,结果显示植入的MSCs不表达FSHR和LHR。RT-PCR结果显示分泌类固醇激素细胞相关受体表达降低。
  结论:
  MSCs移植入小鼠受损卵巢后可长时间存在于卵巢组织,但其并未分化为卵巢内能够生成类固醇激素的细胞,其血清学、病理学及RT-PCR结果提示MSCs对VCD诱导所致小鼠卵巢功能衰竭的功能呈现的假“修复”,事实是卵巢功能进一步衰退的表现,其机制可能是MSCs在受损卵巢中发生了异常分化。

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