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新型纳米微囊-VEGF复合体转染鼠成纤维细胞的体外试验研究

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摘要

目的:探讨新型纳米微囊载体应用于基因治疗的可行性,安全性、转染效率、转移方法并与阳离子脂质体、质粒DNA进行比较.方法:以血管内皮细胞生长因子(VEGF<,165>)为目的基因,构建真核表达载体pcDNA3.1/myc-hisA-VEGF<,165>分别利用纳米微囊、阳离子脂质体介导VEGF<,165>转染鼠成纤维细胞(NIH3T3),转染4小时后镜下观察细胞转染后表型变化,48h后通过绿色荧光蛋白的表达观察瞬时转染效率,通过免疫组织化学、Western Blot检测基因表达水平及定位.MTT法检测对转基因细胞的毒性.ELISA检测经G418筛选后上清培养液VEGF蛋白持续表达情况.结论:纳米微囊转基因载体作为一种新型非病毒载体,具备基因治疗应用潜能,有可能为血管重建基因治疗提供一种新的模式.

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