第一部分不同干预措施对废用性骨质疏松治疗的实验和临床研究;第二部分 RNAi法特异性抑制RANKL的表达

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第一部分不同干预措施对废用性骨质疏松预防的实验和临床研究;废用性骨质疏松(DOP,Disuse Osteoporosis;or IOP,Immobilization Osteoporosis)是由于机械应力对骨的作用减少导致的局部或者全身骨量丢失和骨质量的降低.负重和运动对骨骼的生长、再建和骨量的维持是一种机械性刺激,较低或者完全丧失这种刺激对骨的作用,将诱导加速破骨细胞介导的骨吸收,并抑制成骨细胞介导的骨形成,从而导致骨丢失.这种废用性骨质疏松随着时间的变化而进展,而且在病理性骨折出现之前很少有进展的外在表现.治疗性卧床、脊髓损伤后截瘫或下肢轻瘫、由于中风导致的偏瘫或轻偏瘫、采用石膏治疗骨折和创伤所导致的局部制动以及失重都可导致废用性骨质疏松.其中,以肢体制动和长期卧床这两个原因最为常见.由于IOP的临床发生率非常高,不仅给患者带来巨大的身心痛苦,而且给社会带来沉重的经济负担.一、IOP动物模型的建立及鉴定.二、口服依膦对废用性骨质疏松的预防作用.三、脉冲电磁场对废用性骨质疏松的预防作用.四、中药强肾健骨冲剂对废用性骨质疏松的预防作用.五、PEMFs和依膦对废用性骨质疏松的临床预防作用.第二部分 RNAi法特异性抑制RANKL的表达;在该研究中,我们尝试使用RNAi的方法来减少RANKL的表达量从而达到减少骨吸收的目的,根据大鼠的骨保护素配体的基因序列,我们参考骨保护素配体mRNA的空间结构,设计发卡结构小干预RNA模版,并构建由U6启动子引导产生小干预RNA的质粒载体.转染大鼠骨髓基质细胞48h后提取细胞总RNA,RT-PCR以及northern blot,以骨保护素配体与内参β-actin扩增产物的光密度比值来反映骨保护素配体mRNA的表达情况,结果进行统计学分析.最终我们成功获得U6启动子引导产生小干预RNA的质粒载体并证实转染骨髓基质细胞后细胞中骨保护素配体mRNA的表达量随着质粒载体量的增加而减少.这些结果为基因治疗骨质疏松等骨代谢类疾病奠定了基础.

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作者
戴先文;
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作者单位

第四军医大学;

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授予单位第四军医大学;
学科外科学(骨外)
授予学位博士
导师姓名王全平;
年度 2004
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类 R681.05;
关键词
废用性; 骨质疏松; 动物模型; 预防; RNA干涉; RANKL; 基因治疗;

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