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第一部分文献综述
第二部分材料和方法
1.主要试剂与仪器
1.1基本试剂及生产厂家
1.2本实验所用的菌株
1.3主要仪器和厂家
1.4试剂和培养基
2.实验方法
2.1基本方法
2.2融合蛋白CB-hLy在大肠杆菌E.coil中的诱导表达
2.3融合蛋白Cecropin B-hLysozyme的纯化
2.4变性聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)凝胶电泳[65]
2.5蛋白浓度分析[66]
2.6融合蛋白Cecropin B-hLysozyme生物活性检测
第三部分结果与分析
1.融合蛋白CB-hLy在大肠杆菌E.coil中的诱导表达
1.1在37℃下，BL21(DE3)和BL21(DE3)pLysS的诱导表达
1.2在25℃诱导温度下，BL21(DE3)和BL21(DE3)pLysS的诱导表达
1.3诱导前更换培养基对融合蛋白CB-hLy表达量的影响
1.4重组菌株pET32a-CB-hLy/BL21(DE3)pLysS诱导时机的分析
1.5诱导时间对融合蛋白CB-hLy表达量的影响
1.6融合蛋白Cecropin B-hLysozyme在重组菌株中的表达分析
2融合蛋白Cecropin B-hLysozyme的纯化
2.1 Ni2+螯合的Chelating Sepharose F.F.亲合柱色谱
2.2 Sephadex G-75凝胶排阻柱色谱
3融合蛋白CB-hLy浓度的分析
4融合蛋白CB-hLy的活性检测
第四部分结论
1结论
2存在的主要问题
参考文献
致 谢
