番茄褪绿病毒RT-PCR检测方法的优化及环保酵素对番茄褪绿病毒病抗性影响的研究

声明

第一章引言

1.1.1番茄褪绿病毒的基因组结构

1.1.2番茄褪绿病毒病的发病症状

1.1.3番茄褪绿病毒的传播方式及寄主范围

1.1.4番茄褪绿病毒病的发病规律

1.1.5番茄褪绿病毒病分布地区

1.1.6番茄褪绿病毒的检测方法

1.1.7番茄褪绿病毒病的防控措施

1.2.1番茄黄化曲叶病毒的基因组结构及分类

1.2.2番茄黄化曲叶病毒病的发病症状

1.2.3番茄黄化曲叶病毒的传播方式及寄主范围

1.2.4番茄黄化曲叶病毒病的发病规律

1.2.5番茄黄化曲叶病毒病的分布地区

1.2.6番茄黄化曲叶病毒的检测方法

1.2.7番茄黄化曲叶病毒病的防控措施

1.3番茄病毒检测方法的研究进展

1.4环保酵素的发展现状

1.4.1环保酵素的起源及制作

1.4.2环保酵素的作用

1.5本研究的目的与意义

第二章材料与方法

2.1.1样品采集

2.1.2试剂与耗材

2.1.3主要试验仪器

2.1.4引物的设计与合成

2.2试验设计及方法

2.2.1番茄褪绿病毒RT-PCR检测方法优化

2.2.2样品RNA提取

2.2.3cDNA的合成

2.2.4样品DNA提取

2.2.5PCR扩增

2.2.6PCR产物的检测

2.2.7实时荧光定量PCR检测

2.2.8环保酵素对番茄幼苗生长的影响

2.2.9环保酵素影响番茄对ToCV抗病性的效果

第三章结果与分析

3.1.1引物灵敏度的比较

3.1.2引物特异性比较

3.1.3RT-PCR检测体系反应条件的优化

3.2.1陕西关中地区ToCV的检测

3.2.2ToCV分离物外壳蛋白基因扩增

3.2.3ToCV分离物热激蛋白基因扩增

3.3番茄褪绿病毒的序列相似性比对及进化树分析

3.4番茄褪绿病毒与番茄黄化曲叶病毒的复合侵染分析

3.5荧光定量PCR检测

3.5.1引物特异性PCR检测

3.5.2qPCR检测番茄褪绿病毒

3.6环保酵素对番茄幼苗生长及ToCV抗病性的影响

3.6.1环保酵素对番茄幼苗的影响

3.6.2环保酵素对番茄抗番茄褪绿病毒的影响

第四章问题与讨论

4.1番茄褪绿病毒RT-PCR检测方法的优化

4.2番茄褪绿病毒的分子检测及序列同源性分析

4.3番茄褪绿病毒与番茄黄化曲叶病毒的复合侵染

4.4番茄褪绿病毒实时荧光定量PCR检测

4.5环保酵素处理对番茄幼苗及对番茄褪绿病毒病抗病性的影响

第五章结论与展望

参考文献

致谢

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