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摘要
第一章 哺乳动物卵母细胞不对称性的主要分子基础
1.1 减数第一次分裂的对称性破坏和纺锤体迁移
1.1.1 Formine2等成蛋白家族介导Actin成核,起始纺锤体迁移
1.1.2 Arp2/3(Actin-related protein 2/3)复合物指挥的胞质流动驱动一个快速纺锤体移动相
1.1.3 对称性破坏和纺锤体迁移的双相模型
1.2 纺锤体定位以及皮质极化
1.2.1 减数分裂纺锤体发出皮质极性建立的信号
1.2.2 皮质Actin装配促进染色体和纺锤体定位
第二章 Dlg1(Discs large homologue 1)研究进展
2.2 Dlg1蛋白的功能
2.3 Dlg1与卵子发育
第三章 下调Dlg1对猪卵母细胞体外发育的影响
3.1 材料
3.1.1 仪器设备
3.1.2 主要试剂及培养液配制
3.1.3 实验材料及耗材
3.2 方法
3.2.1 猪卵巢获取、卵母细胞培养
3.2.2 卵丘颗粒细胞的去除
3.2.3 MⅡ期卵的激活及早期胚胎培养
3.2.4 显微注射用针的制备
3.2.5 多种猪组织细胞中Dlg1 mRNA的表达检测
3.2.6 猪卵母细胞与早期胚胎中Dlg1的表达和定位分析
3.2.7 siRNA干扰
3.2.8 数据统计及分析
3.2 结果
3.2.3 荧光显微镜观察Dlg1在猪早期胚胎中的表达定位
3.2.4 不同siRNAs对Dlg1表达的干扰效率检测
3.2.5下调Dlg1表达显著降低猪卵母细胞体外成熟率
3.2.6 下调Dlg1表达影响猪卵母细胞纺锤体的形成
3.2.7 孤雌激活后Dlg1的下调不影响猪胚胎卵裂以及囊胚形成
3.3 讨论
结论
本研究的创新点与进一步研究的课题
参考文献
致谢
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