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【6h】

强脉冲光照射对皮肤结构和胶原蛋白表达影响的实验研究

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摘要

背景：
　　 皮肤老化分为自然老化和光老化。后者主要由日光中的紫外线照射引起，特别是长波紫外线(UVA)的照射。对于光老化皮肤的治疗经历了两个阶段：有创性治疗和无创性治疗，由于前者副作用较多，故其应用逐渐减少。强脉冲光(Intense Pulsed Light IPL)技术是近年来产生的一种治疗光老化皮肤的新的无创性方法，在临床研究中己证实能有效地改善光老化皮肤的许多症状，所以在临床得以普遍应用。在强脉冲光照射对皮肤光老化的研究方面，虽然取得了一定的成绩，但也存在分歧，并且以前的研究都是在正常组织和细胞上进行。正常细胞与光老化细胞的情况相差甚远。皱纹是皮肤衰老的外部表现之一，临床表现为深大、沟槽样的皱纹，皮肤松弛，呈皮革样外观，顺应性下降，脆性增加，损伤愈合能力下降等。组织学水平可见细胞外基质(extracellular matrix ECM)成分的异常改变，主要是因为胶原含量的减少而引起表皮的塌陷。在细胞生物学研究方面，目前文献在治疗皮肤皱纹的分子生物学作用机制研究较少。
　　 目的：
　　 用强脉冲光照射SD大鼠背部皮肤后，观察皮肤外观的变化及其组织学的改变：了解皮肤Ⅰ型胶原蛋白mRNA的表达；定量分析皮肤Ⅰ型胶原蛋白蛋白质水平，为探讨IPL治疗皮肤皱纹的分子生物学作用机制提供理论依据。
　　 方法：
　　 选择6只SD大鼠，IPL照射前24h对大鼠背部皮肤进行剃毛和脱毛，然后将背部皮肤划分为四个区域，分别是：对照组、10J/cm2照射组、18J/cm2照射组和26J/cm2照射组，照射区采用强脉冲光照射，波段560nm-1000nm，脉冲3.0ns，脉宽30nm，能量分别为10J/cm2，18J/cm2和26J/cm2，照射时间为5ms。对照区不照射。连续照射四次，每次间隔时间为2天。IPL照射完成后一个月后取皮肤样本进行皮肤病理学和分子生物学检测。
　　 结果:
　　 肉眼观察：照射后第1天1例大鼠高能量照射区皮肤出现短暂性潮红，2天后消退。均无遗留色素沉着、紫癜、水疱、水肿等副作用，照射后第14天开始，照射区皮肤变得光滑、细腻，有光泽。对照区皮肤形态无改变。IPL各照射组较对照组比较，真皮厚度差异有显著性(F=20.046，P<0.01)。其中IPL26J/cm2照射组真皮厚度为1332.8±83.7μm，分别与其他三组比较，均有显著性差异(P均<0.05)。IPL26J/cm2照射组光镜下病理改变与其他三组比较，胶原蛋白排列最为致密，染色最深，效果最好。和对照组相比，18J/cm2照射组和26J/cm2照射组皮肤中Ⅰ型胶原蛋白的mRNA水平有明显的表达。然而，10J/cm2照射组没有观察到明显的胶原蛋白表达增加的现象。10J/cm2照射组和18J/cm2照射组皮肤中Ⅰ型胶原蛋白的表达与对照组比较有明显的改善。但是，26J/cm2照射组皮肤中Ⅰ型胶原蛋白的表达与对照组比较无明显改善。
　　 结论：
　　 IPL各照射组较对照组比较，真皮厚度差异有显著性(F=20.046，P<0.01)，说明IPL照射明显改善了大鼠皮肤的结构。IPL26J/cm2照射组光镜下病理改变与其他三组比较，胶原蛋白排列最为致密，染色最深，效果最好。和对照组相比，18J/cm2照射组和26J/cm2照射组皮肤中Ⅰ型胶原蛋白的mRNA水平有明显的表达，然而在10J/cm2照射组没有观察到明显的胶原蛋白表达增加的现象。10J/cm2照射组和18J/cm2照射组皮肤中Ⅰ型胶原蛋白的表达与对照组比较有明显的改善，但26J/cm2照射组中Ⅰ型胶原蛋白的表达与对照组比较无明显改善，这表明能量的高低对Ⅰ型胶原蛋白的mRNA水平和蛋白的表达有明确的影响。

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