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【6h】

新型人钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ抑制蛋白hCaMKIINα的克隆及其生物学功能研究

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目录

缩略词表

前言

第一部分hCaMKIINα的克隆、序列分析及组织细胞分布

第二部分hCaMKIINα与CaMKII的相互作用及27肽保守抑制区的功能分析

1材料与方法

2实验结果

3.讨论

第三部分hCaMKIINα抑制人结肠癌LoVo细胞生长的功能研究及其作用机制探讨

小 结

参考文献

致 谢

钙离子/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ及其抑制剂对细胞生长的调控 文献综述

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摘要

该实验对该室自行发现的新型人钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ抑制蛋白hCaMKIINα进行了生物学功能的初步研究.hCaMKIINα是CaMKII抑制蛋白家族的一个新成员,广泛存在于多种组织和肿瘤细胞中;hCaMKIINα在体内体外可与活化的CaMKII发生结合,并可抑制CaMKII酶活性,且其分子C端所包含的27肽保守抑制区在其对CaMKII活性抑制中起关键作用.以人结肠癌细胞LoVo为细胞模分析了hCaMKIINα对肿瘤细胞生长的调控作用,结果表明hCaMKIINα体外可抑制LoVo细胞的生长,体内可明显抑制接种于裸鼠皮下的LoVo肿瘤的生长.进一步研究表明,hCaMKIINα对LoVo细胞的生长抑制作用并非通过诱导其凋亡,而是引起细胞周期S期的积累;利用Western印迹检测到瞬时表达hCaMKIINα可引起细胞周期蛋白cyclinA、p53、p27的表达水平上调,从而使LoVo细胞停滞于S期,进而抑制LoVo细胞生长,为hCaMKIINα抑制人结肠癌细胞生长的作用机制提出了新的认识.钙调素激酶Ⅱ及其抑制剂可通过调节细胞周期的进程而影响细胞的生长过程,肿瘤是细胞周期失控、分化异常的疾病,该实验结果证实我们可以通过利用钙调素激酶Ⅱ抑制蛋白抑制肿瘤细胞生长,因此,我们自主发现的新型hCaMKIINα的应用将为肿瘤治疗提出新的策略和研究方向,进一步深入研究新型hCaMKIINα的结构与功能是一项很有价值和前景的工作.

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