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【6h】

噬菌体phi29 gp16蛋白C端结构域溶液中的构象分析

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第1章 绪论

1.1 引言

1.2 双链DNA病毒及噬菌体phi29的研究现状

1.2.1 双链DNA病毒的发现及发展

1.2.2 双链DNA病毒的包装机制

1.2.3 噬菌体phi29的DNA包装马达的重要成分

1.2.4 噬菌体phi29末端酶gp16蛋白结构与功能的研究

1.3 小角散射的研究现状

1.3.1 小角散射的发现与发展

1.3.2 小角散射的实验原理

1.3.3 小角散射的数据分析

1.4 研究意义及创新点

1.4.1 目的与意义

1.4.2 创新点

第2章 噬菌体phi29 gp16蛋白C端结构域的表达与纯化

2.1 实验材料与仪器

2.1.1 菌株、载体和基因

2.1.2 实验材料及试剂

2.1.3 实验相关的设备和仪器

2.1.4 常用的试剂及溶液配制(1)K+抗生素(50 mg/mL)

2.2 实验方法

2.2.1 重组质粒的构建(1)模板基因

2.2.2 细胞培养及诱导表达

2.2.3 细胞收集与破碎(1)细胞收集

2.2.4 HIS-SUMO-gp16-C的亲和纯化

2.2.5 HIS-SUMO-gp16-C的ULP1酶切分析

2.3 结果与分析

2.3.1 HIS-SUMO-gp16-C重组质粒的鉴定

2.3.2 HIS-SUMO-gp16-C的诱导表达1)HIS-SUMO-gp16-C的快速诱导

2.3.3 HIS-SUMO-gp16-C的亲和纯化

2.3.4 HIS-SUMO-gp16-C的酶切分析

2.4 本章小结

第3章 噬菌体phi29 gp16蛋白C端结构域的结构解析

3.1 实验仪器与材料

3.1.1 实验材料及试剂

3.1.2 实验相关的设备与仪器

3.1.3 常用的试剂及溶液配制1.分子筛缓冲液配制1 L

3.2 实验方法

3.2.1 分子筛层析纯化

3.2.2 gp16 C端的小角散射

3.2.3 gp16 C端的小角散射条件的优化

3.2.4 小角散射的数据收集及分析

3.2.5 同源蛋白质序列比对

3.2.6 模型拟合

3.3 实验结果

3.3.1 分子筛层析纯化分析

3.3.2 gp16 C端的小角散射分析

3.3.3 gp16 C端的小角散射优化结果

3.3.4 生物信息学分析

3.3.5 gp16 C端的结构域的结构解析

3.4 本章小结

第4章 结论与展望

4.1 结论

4.2 展望

参考文献

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著录项

  • 作者

    武飞飞;

  • 作者单位

    东华大学;

  • 授予单位 东华大学;
  • 学科 生物化学与分子生物学
  • 授予学位 硕士
  • 导师姓名 陆昌瑞;
  • 年度 2019
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 中文
  • 中图分类
  • 关键词

    噬菌体; gp16; 蛋白; 结构域; 溶液;

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