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毛细管电泳-紫外联合电导检测器同时测定连翘中活性成分的研究

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第一章 绪论

1.1 毛细管电泳概述

1.2 连翘的研究进展

1.3β-CD及其在三萜酸拆分中的应用

1.4化学计量学概述

1.5 本研究课题的目的和意义

第二章 CE-UV对连翘中三种重要三萜酸的分离检测

2.1 前言

2.2 实验仪器、药品与方法

2.3 结果与讨论

2.4 本章小结

第三章 CE结合化学计量学对连翘采收季节和产地的评价

3.1 引言

3.2 实验仪器、药品与方法

3.3 结果与讨论

3.4 本章小结

第四章 CE-C4D对连翘中三种金属元素的检测及机理的探讨

4.1 引言

4.2 实验仪器、药品与方法

4.3 结果与讨论

4.4 本章小结

第五章 结论与展望

5.1 结论

5.2 展望

参考文献

附录一

附录二

硕士期间发表的论文：

致谢

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摘要

连翘（Forsythiae Fructus），是木犀科（Oleaceae）连翘属（Forsythia）植物的果实，是一种传统的中草药。根据采摘季节的不同，连翘又可以被分为青翘和老翘，二者都具有清热解毒，抗菌消炎的功效。在以往的研究中，人们更多的是通过连翘的主成分来研究其药理药效作用，然而，药理学表明，连翘中所含有的三种重要的微量成分——三萜酸（齐墩果酸、熊果酸和白桦脂酸）与连翘的抗菌消炎的作用有着直接的关系。并且，三萜酸也具有其各自独特的药理药效作用。因此，为了更加全面的评价以及有效的利用野生青翘和老翘资源，本课题重点讨论和研究了三萜酸在连翘中含量以及含量与连翘产地和采摘季节的关系。鉴于这三种三萜酸互为同分异构体，在众多的分离方法中，毛细管电泳技术因其高效快速，分离能力强，对实际样品检测时，样品前处理简单等优势，被广泛的应用于各类物质的分离。同时，连翘中所含有的金属元素对连翘的药理药效作用也起到了不可忽视的作用。本课题旨在开发快速、简单的三萜酸的毛细管电泳-紫外检测方法，以连翘中三萜酸的含量为指标，采用化学计量学的方法对不同地域和采收季节的连翘进行评价；同时采用毛细管电泳-非接触电导检测器开发了三种微量元素的分析方法，并重点讨论了电导检测器在金属离子检测中出现正负峰的原因。
　　第一章介绍的毛细管电泳的基本结构和基本原理、连翘的研究进展、β-环糊精在异构体拆分过程中的基本理论以及化学计量学的基础知识。其中，重点对三萜酸分离的不同色谱方法进行综述，在对比中突出了毛细管电泳对三萜酸拆分的优势。提出了毛细管电泳应用于三萜酸的分离与定量对连翘质量评价的良好应用前景。
　　第二章对三种三萜酸的毛细管电泳-紫外检测的方法进行开发，通过对背景电解质和拆分剂的种类、浓度进行考察，重点讨论了β-环糊精在三种三萜酸分离过程中的拆分机理，成功计算得到了三种三萜酸与β-环糊精的结合常数，进一步指导了三萜酸的拆分。最终确立了最佳的电泳分离条件为50 mmol/L的硼砂，0.5 mmol/L的β-环糊精，在pH值为9.5的条件下，齐墩果酸、熊果酸和白桦脂酸实现了基线分离。方法的精密度良好（迁移时间和峰面积的RSD均小于5.0％），在5μg/mL至80μg/mL的浓度范围内呈良好的线性关系，检出限达到1.28-1.76μg/mL。本章中三萜酸的分离无需任何衍生手段，具有很强的通用性。
　　第三章基于最佳的三萜酸的分离条件，对来自全国12个产地的19种连翘样品中的三萜酸进行检测和定量。再以三种三萜酸的含量为指标，采用层序聚类分析和主成分分析的方法对连翘样品的地域以及采收时间进行了科学的评价，研究得到的一些结论表明，青翘中三萜酸的含量较老翘中的含量普遍较高，且熊果酸是三种三萜酸中含量最高的成分，白桦脂酸在所有老翘中均得到了检出。本方法对连翘的质量监控提供了新的思路和方法。
　　第四章建立了毛细管电泳-非接触电导检测法对连翘中三种金属元素（Mg2+、Zn2+、Cu2+）的检测方法。本方法分析速度快、成本低廉，较传统的原子吸收法具有极强的优势。同时，通过研究背景电解质的组成变化、pH改变等因素，结合理论知识，重点讨论了电导检测过程中出现正峰负峰的原因所在。
　　第五章为本研究内容的结论与展望。

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