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氡与吸烟联合致肺癌机理研究

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摘要

前言

第一部分α粒子和CSC对BEP2D细胞的损伤效应

一、引言

二、实验材料和方法

三、实验结果

四、讨论

五、小结

第二部分α粒子与CSC诱发BEP2D细胞转化及机理

一、引言

二、材料和方法

三、实验结果

四、讨论

五、小结

全文结论

参考文献

附录

致谢

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摘要

目的意义：通过建立α粒子和CSC(烟草凝集物)联合暴露的细胞模型，观察在体外培养条件下α粒子和CSC联合作用BEP2D细胞所导致的细胞毒性和慢性转化效应，探讨二者作用顺序的差异，为环境氡与吸烟的联合危害评价提供理论依据。 材料与方法：永生化的人支气管上皮细胞(BEP2D)，分正常组、单纯α粒子照射、单纯CSC染毒、CSC染毒后α粒子照射和α粒子照射后CSC染毒，测定细胞毒性和恶性转化效应相关指标。 实验结果： (1)细胞存活曲线结果，单纯CSC染毒或α粒子照射BEP2D细胞的平均致死剂分别为3μg/ml和0.7Gy。 (2)单纯α照射或CSC染毒对细胞内活性氧水平(ROS)、细胞膜损伤(LDH)、线粒体损伤(NAO)、脂质过氧化损伤(MDA)、超氧化物岐化酶活力(SOD)、硒谷胱甘酞过氧化物酶活力(SeGPx)、凋亡率、DNA损伤参数及8-羟基脱氧鸟苷(8-OH-dG)的产生均有显著影响，呈现剂量依赖关系。二者联合作用对细胞的损伤作用更为严重。 (3)联合作用中，部分指标(如ROS、NAO、MDA、SOD、SeGPx及凋亡率等)先CSC染毒后α粒子照射，均低于期望值，且低剂量更明显，而先α粒子照射后CSC染毒始终呈现协同效应，提示两者作用的先后顺序存在效应上的差异，但其它指标的协同效应未观察到不同作用顺序的差别。 (4)α粒子、CSC单独或联合作用BEP2D细胞，连续培养至35代后，进行细胞生物学特性分析，结果表明，先α粒子照射后CSC染毒组，BEP2D细胞失去了接触抑制，体外生存能力明显增强，获得了锚着独立生长能力；细胞周期处于失控状态(G0/G1期细胞比例明显减少，G2/M期细胞比例增加，S期明显缩短等)，自发凋亡率增高，呈现恶性转化特征，而其他处理组均未观察到与正常细胞有显著差异的变化。 结论：α粒子和CSC联合损伤效应具有明确的协同性，并与两者作用的先后顺序有关，先α粒子照射后CSC染毒比先CSC染毒后α粒子照射组具有更高的致癌危险性。

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