可降解聚酯多孔支架的羟基磷灰石修饰、体外研究和体内骨缺损修复

摘要

第一章 绪论

1．1 前言

1．2 聚酯材料的降解

1．2．1 聚酯材料的降解机理

1．2．2 影响聚酯材料降解的因素

1．2．3 聚酯多孔支架材料的降解

1．3 无机／聚酯复合体系多孔支架

1．3．1 无机／聚酯复合材料多孔支架

1．3．2 聚醅多孔支架表面的无机材料修饰

1．3．3 无机／聚酯复合体系多孔支架的体外体内研究

1．4 课题的提出

参考文献

第二章 可降解聚酯多孔支架的制备及其降解液对骨髓基质干细胞体外活力和成骨分化的影响

摘要

2．1 前言

2．2 实验部分

2．2．1 试剂与耗材

2．2．2 PLGA多孔支架的制备

2．2．3 PLGA多孔支架的体外降解

2．2．4 骨髓基质干细胞的分离

2．2．5 实验组设置

2．2．6 乳酸脱氢酶检测

2．2．7 细胞死活染色

2．2．8 MTT实验

2．2．9 碱性磷酸酶染色以及定量表征

2．3 结果

2．3．1 PLGA多孔支架的降解

2．3．2 降解液对骨髓基质干细胞活力和成骨分化的影响

2．4 讨论

2．5 本章小结

参考文献

第三章 聚酯材料降解产物乳酸对骨髓基质干细胞体外活力和成骨分化的影响

摘要

3．1 前言

3．2 实验部分

3．2．1 试剂与耗材

3．2．2 实验组的设置

3．2．3 骨髓基质干细胞的分离

3．2．4 骨髓基质干细胞的培养和成骨诱导

3．2．5 MTT实验

3．2．6 细胞死活染色

3．2．7 碱性磷酸酶染色以及定量表征

3．2．8 RNA提取和实时荧光定量聚合酶链式反应

3．2．9 统计学分析

3．3 结果

3．3．1 不同实验组细胞培养液pH值的变化

3．3．2 细胞活力

3．3．3 成骨分化

3．4 讨论

3．4．1 产生乳酸细胞毒性的主要原因

3．4．2 L-乳酸与D，L-乳酸是否存在不同细胞毒性

3．4．3 关于骨髓基质干细胞对乳酸耐受程度的讨论

3．5 本章小结

参考文献

第四章 PLGA多孔支架孔表面的纳米羟基磷灰石修饰和体外评价

4．1 前言

4．2 PLGA多孔支架孔表面的纳米羟基磷灰石修饰

4．2．1 试剂与耗材

4．2．2 PLGA多孔支架的制备

4．2．3 改进模拟体液的配制

4．2．4 PLGA多孔支架的等离子体处理

4．2．5 PLGA多孔支架孔表面的纳米羟基磷灰石修饰

4．2．6 多孔支架的理化性能表征

4．2．7 多孔支架的理化性质

4．2．8 关于nHAp／PLGA多孔支架制备方法的讨论

4．3 nHAp／PLGA多孔支架的细胞相容性

4．3．1 试剂与耗材

4．3．2 MC3T3细胞的培养

4．3．3 兔骨髓基质干细胞的提取、分离和培养

4．3．4 多孔支架的消毒处理

4．3．5 多孔支架浸提液的细胞毒性

4．3．6 MC3T3细胞在多孔支架上的增殖

4．3．7 兔骨髓基质干细胞在多孔支架上的增殖

4．3．8 统计学分析

4．3．9 多孔支架的细胞相容性

4．4 本章小结

参考文献

第五章 nHAp／PLGA多孔支架体内修复兔长干骨缺损

摘要

5．1 前言

5．2 动物实验

5．2．1 试剂与耗材

5．2．2 多孔支架和实验动物

5．2．3 兔骨髓基质干细胞的提取、分离和培养

5．2．4 支架消毒处理

5．2．5 动物实验模型以及实验组设置

5．2．6 动物实验手术

5．2．7 四环素-钙黄绿素荧光标记

5．2．8 X射线检查

5．2．9 Micro-CT检查

5．2．10 生物力学检测

5．2．11 组织学染色和观察

5．2．12 统计学分析

5．3 动物实验结果和讨论

5．3．1 用于动物实验的多孔支架

5．3．2 体内影像学结果

5．3．3 生物力学检测结果

5．3．4 四环素-钙黄绿素荧光标记测定新骨生成速率

5．3．5 组织学观察结果

5．3．6 关于nHAp／PLGA多孔支架修复桡骨缺损的讨论

5．4 本章小结

参考文献

第六章 羟基磷灰石微图案阵列的制备及细胞定位功能的实现

摘要

6．1 前言

6．2 玻璃基底表面羟基磷灰石微图案阵列的制备

6．2．1 试剂与耗材

6．2．2 玻璃基底表面金微图案阵列的制备

6．2．3 改进模拟体液的配制

6．2．4 样品1的制备方法

6．2．5 样品2的制备方法

6．2．6 样品3(羟基磷灰石微图案阵列)的制备方法

6．2．7 样品的理化性能表征

6．2．8 结果与讨论

6．3 利用non-fouling背景上羟基磷灰石微阵列实现细胞定位黏附

6．3．1 试剂与耗材

6．3．2 羟基磷灰石微图案阵列玻璃背景的聚乙二醇钝化处理

6．3．3 在具有细胞黏附反差性能羟基磷灰石微图案阵列上的细胞培养

6．3．4 羟基磷灰石微米岛上黏附细胞的荧光染色和显微镜观察

6．3．3 羟基磷灰石微图案阵列上细胞定位黏附的实现

6．4 本章小结

参考文献

第七章 全文总结

7．1 论文的创新性

7．2 论文的理论和实际意义

7．3 论文的不足与展望

附录

作者简历

致谢

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