负载凋亡肿瘤细胞抗原的树突状细胞疫苗对小鼠膀胱癌的抑制作用

代理获取

页面导航

目录
摘要
著录项
相似文献
相关主题

摘要

目的：树突状细胞(dendritic cell,DC)是迄今为止所知道的抗原递呈功能最强的专职抗原递呈细胞(antigen presenting cell，APC)，也是唯一可以激活初始免疫反应的APC，在对肿瘤产生主动免疫上起着重要的作用。树突状细胞瘤苗的制备与应用成为了肿瘤免疫治疗的研究热点。本实验研究辐射凋亡肿瘤细胞诱导的DC疫苗的制备及对C57BL/6小鼠负载膀胱肿瘤的免疫学效应。
　　方法：采用辐射法获取MB49细胞抗原并用其致敏骨髓来源的DC来制备DC疫苗。DC采用骨髓分离法从C57BL/6小鼠骨髓中分离细胞，接种于含10％胎牛血清的RPMI1640培养基中，加入重组鼠粒巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)、重组鼠白细胞介素4(rmIL-4)，体外诱导培养为未成熟DC，于第6天分别加入经辐射获取的凋亡的MB49小鼠膀胱癌细胞，刺激使其成熟，制备膀胱肿瘤疫苗。观察其形态同时流式细胞仪检测各组成熟DC表面分子CD80、CD86的表达情况。用MB49小鼠膀胱癌细胞建立荷瘤动物模型，随机分为实验组和实验对照组，于肿瘤细胞接种后第7、14天给予相应DC疫苗治疗或者PBS，每组分2亚组，分别用于测量瘤质量、体积及用于观察荷瘤小鼠存活情况。
　　结果：经鉴定建立的以DC为基础的膀胱肿瘤疫苗具有典型DC形态学和表型特征。DC疫苗扩增到第5天，通过检测表面抗体显示CD11c高表达，但是CD80，CD86以及I-A低表达，提示为未成熟DC细胞。加入LPS共同培养后第7天通过检测CD80，CD86以及I-A提示DC细胞成熟。培养至第5天的小鼠骨髓来源的未成熟DC和经照射获得的凋亡小鼠膀胱癌细胞及无血清共培养1天后，经过流式细胞仪测定显示未成熟DC细胞成为成熟的DC细胞。经过X射线照射三天后肿瘤细胞的凋亡达到最佳数目。负载辐射凋亡肿瘤细胞抗原的DC疫苗实验组荷瘤鼠肿瘤平均体积和平均瘤质量均显著低于对照组(P＜0.01)，生存期长于对照组，并且有2只小鼠无瘤长期存活。经DC疫苗实验组治愈的2只小鼠30天后无肿瘤生长，再次皮下接种MB49细胞观察30天仍无肿瘤发生。
　　结论：DC是功能最强大的抗原提呈细胞，负载辐射凋亡肿瘤细胞的DC疫苗对膀胱肿瘤荷瘤小鼠具有抑瘤效应和生存期延长作用。我们建立的DC疫苗诱导的特异性CTL对MB49小鼠膀胱癌细胞建立荷瘤动物模型具有的很强的细胞毒活性。负载肿瘤抗原的DC疫苗可诱导机体产生并维持长期的肿瘤记忆性细胞免疫反应，对膀胱肿瘤细胞再次攻击具有免疫保护作用，在膀胱肿瘤复发预防中具有良好应用前景。充分说明以DC为中心的肿瘤生物治疗有望提高膀胱癌综合治疗水平。

著录项

作者
谢雪锋;
展开▼
作者单位

复旦大学;

展开▼
授予单位复旦大学;
学科外科学（泌尿外科）
授予学位硕士
导师姓名陈刚;
年度 2014
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类膀胱肿瘤;免疫疗法;
关键词
膀胱癌; 免疫疗法; 树突状细胞疫苗; 动物模型;

相似文献

中文文献
外文文献
专利

1. 负载辐射凋亡MB49肿瘤细胞抗原的树突状细胞(DC)疫苗对小鼠膀胱癌的抑制作用 [J] . 谢雪锋 ,侯剑刚 ,陈刚 . 复旦学报（医学版） . 2014,第001期
2. 负载Walker-256肿瘤细胞抗原的树突状细胞疫苗的制备 [J] . 喻钢 ,王建 . 实用癌症杂志 . 2008,第004期
3. 负载MB49肿瘤细胞抗原的DC疫苗对膀胱癌的抑制效应及机制 [J] . 伦恒忠 ,郭路生 ,张佩 . 山东医药 . 2010,第039期
4. 热休克肿瘤细胞抗原负载的树突状细胞对结肠癌小鼠的治疗作用 [J] . 刘胜 ,应敏刚 ,龚福生 . 中国癌症杂志 . 2008,第001期
5. 咖啡酸锗对小鼠U14瘤的抑制作用及其诱导肿瘤细胞凋亡的机制研究 [J] . 黄越燕 ,肖纯 ,吴铭娟 . 中国病理生理杂志 . 2008,第008期
6. 冬仙胶囊对荷瘤小鼠肿瘤细胞凋亡及BAX、bcl-6、Hsp27表达的作用 [C] . . 第六次全国中西医结合中青年学术研讨会 . 2008
7. 凋亡肿瘤细胞负载的树突状细胞疫苗抗肺癌的实验研究 [A] . 杨新静 . 2006

负载凋亡肿瘤细胞抗原的树突状细胞疫苗对小鼠膀胱癌的抑制作用

目录

摘要

著录项

相似文献

相关主题

期刊订阅