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1.引言
2.材料与方法
2.1DNA提取
2.2PCR扩增
2.2.1PCR扩增方法
2.2.2p53外显子5、6、7、8PCR扩增
2.2.3用于DHPLC的p53基因突变分析PCR扩增
2.2.4用于f-ddF的p53基因突变分析PCR反应
2.2.5用于p53序列测定的PCR反应
2.3凝胶电泳
2.4DHPLC层析
3结果
3.1DHPLC
3.1.1DHPLC分离DNA分子的原理
3.1.2PCR的建立
3.1.3缓冲液梯度的建立
3.1.4层析温度的设定
3.2散发性卵巢癌肿瘤抑制基因的突变检测
3.3DHPLC结果
3.4DHPLC阳性通过直接测序证实
3.5f-ddF
3.5.1PCR建立
3.5.2结果
3.6DHPLC和f-ddF检测50例散发性卵巢癌结果的比较
4讨论
4.1DHPLC在筛检肿瘤基因突变中的效率
4.2DHPLC与DNA测序的比较
4.3影响DHPLC筛检突变灵敏度的因素
4.4肿瘤异质性对突变分析的影响
4.5DHPLC和f-ddF方法的比较
5小结
6参考文献
致谢