基于mt LSU rRNA和ITS1-5.8SrRNA-ITS2基因序列的肺孢子虫分子系统发育学研究

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目的：以mtLSUrRNA和ITS1-5.8SrRNA-ITS2两种基因为分子标记，构建系统发育树，探讨肺孢子虫与宿主的进化关系以及属的分类地位。方法：采用按动物实际体重定量皮下注射地塞米松法诱导实验动物(SD大鼠、ICR小鼠、长爪沙鼠、新西兰白兔、C57BL/6N小鼠和豚鼠)感染肺孢子虫。收集实验动物肺泡灌洗液、肺组织、临床疑似病例痰液样本。提取肺孢子虫总DNA。设计合成扩增2个目的基因PCR引物，检验其特异性和敏感性。扩增目的基因，产物直接或克隆测序，分析比较序列的同源性和进化距离。结合GenBank中相关基因序列构建分子系统发育树。结果：从建立的PCP动物模型及临床病例样本获得了肺孢子虫DNA。获得了4种宿主该虫mtLSUrRNA基因5个序列，其中人1和长爪沙鼠肺孢子虫的该基因序列未见报道。获得4种宿主该虫的ITS1-5.8SrRNA-ITS2基因4个序列，其中长爪沙鼠和新西兰白兔肺孢子虫的该基因序列未见报道。构建了肺孢子虫系统发育树。结论：按动物实际体重定量皮下注射地塞米松方法建立了低死亡率PCP动物模型。PCR检测mtLSUrRNA基因法对PCP检测可行。肺孢子虫具有遗传多样性和宿主特异性，与其宿主之间呈协同进化关系。长爪沙鼠和新西兰白兔肺孢子虫可能是该属中独立的“种”。肺孢子虫属归属于真菌界的子囊菌门。

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作者
张帆;
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作者单位

解放军军事医学科学院;

中国人民解放军军事医学科学院;

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授予单位解放军军事医学科学院;中国人民解放军军事医学科学院;
学科病原生物学
授予学位博士
导师姓名卢思奇;
年度 2005
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类孢子虫;
关键词
肺孢子虫; 分子系统发育; 内转录间隔区; 核糖体RNA基因; 线粒体核糖体大亚基RNA基因; 基因序列;

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