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镉对雌性鹌鹑(Coturnix coturnix japonica)生殖影响的初步研究

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第一章绪论

第二章镉对鹌鹑输卵管的影响

第三章镉暴露对鹌鹑蛋质量的影响

第四章总结

附录

参考文献

致谢

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摘要

随着现代工农业的迅猛发展,含有大量重金属污染物的工农业污水排入环境中,环境中重金属污染的问题已日益严重化。镉在环境中不易挥发,能长期残存,具有长期性、隐蔽性、不可逆性,通过食物链进入到生物体,经生物吸收并积累,可以达到一个很高的浓度。这对鸟类个体、种群乃至群落的生存、发展都会造成影响。为了探讨鸟类接受镉(cadmium,Cd)暴露后对其生殖的影响,本实验选用鹌鹑(Coturnixcoturnixjaponica)作为研究对象,研究了重金属镉对鹌鹑输卵管壶腹部、峡部和卵壳腺(子宫)的相关指标(酶、超微结构、显微结构、分泌物)的影响以及对鹌鹑所产蛋质量的影响。主要研究内容和结果如下: 1.对产卵期鹌鹑卵壳腺ATP酶活性的影响采用肌肉注射的方式进行镉暴露,每隔一天按鹌鹑个体体重给以10mg/kg的氯化镉溶液,于实验的第8天取鹌鹑输卵管卵壳腺,制取10%的组织匀浆液,ATP酶检测试剂盒测定组织匀浆液中的ATP酶活性。结果显示镉暴露组鹌鹑输卵管卵壳腺中Na+/K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性均高于对照组,实验中测得的ATP酶活性升高表明卵壳腺细胞已受到重金属镉的损伤,但细胞功能未完全受到破坏,尚能维持和进行一定的生理活动。 2.对产卵期鹌鹑输卵管结构损伤的观察采用肌肉注射的方式进行镉暴露,每隔一天按鹌鹑个体体重给以10mg/kg的氯化镉溶液,于实验的第8天取鹌鹑输卵管壶腹部、峡部和卵壳腺各几小段,分别制成透射电镜样品和石蜡切片,用于此三部分组织的超微结构和显微结构的观察。超微结构的观察显示镉暴露组鹌鹑此三部分细胞中的线粒体都存在不同程度的肿大,细胞中所含分泌颗粒的大小及数量发生改变,细胞中内质网及高尔基体表现出萎缩的状态。显微结构的观察显示镉暴露组鹌鹑输卵管壶腹部粘膜上皮中的纤毛细胞数量增加,分泌细胞数量减少;峡部粘膜上皮中的纤毛细胞数量减少,分泌细胞数量增加;卵壳腺中未见明显的变化。 3.对产卵期鹌鹑输卵管损伤的组织化学研究采用肌肉注射的方式进行镉暴露,每隔一天按鹌鹑个体体重给以10mg/kg的氯化镉溶液,于实验的第8天取鹌鹑输卵管壶腹部、峡部和卵壳腺各几小段,制成石蜡切片。应用PAS(PeriodicAcidSchiff)染色法、阿尔新蓝(alcianblue)染色法和AB-PAS(alcianblue-PAS)染色法对输卵管壶腹部、峡部和卵壳腺中的分泌物成分进行组织化学染色分析。观察发现镉暴露组壶腹部粘膜上皮中分泌细胞的数量及分泌细胞中所含糖共轭物的量都有所减少;镉暴露组鹌鹑输卵管峡部粘膜上皮中分泌细胞的数量及所含中性糖共轭物的量均多于对照组,且分泌细胞的分泌物中不仅含有中性糖共轭物,还含有对照组峡部粘膜上皮分泌细胞不分泌酸性糖共轭物;镉暴露组卵壳腺粘膜上皮分泌细胞所分泌的子宫液中,酸性糖共轭物的成分缺失。 4.对母体所产鹌鹑蛋品质及蛋壳中的钙、镉含量的影响采用肌肉注射的方式每隔一天按鹌鹑个体体重给以10ma/kg的氯化镉溶液,每天早晚各检查一次笼子,收集各笼鹌鹑所产的鹌鹑蛋。鹌鹑蛋新鲜称重,测量蛋长轴长及短轴长;剖取鹌鹑蛋壳,清洗,烘干至恒重后称重,检测蛋壳中钙和镉的含量并进行卵壳的扫描电镜观察。实验结果显示镉暴露组鹌鹑蛋的蛋重、长径长及蛋形指数和对照组的相比没有显著性差异(p>0.05);镉暴露组的鹌鹑蛋和对照组的相比,在短径长方面表现出显著缩短(p<0.05),在蛋壳重方面表现出极显著减轻(p<0.01),在蛋壳指数方面表现出极显著的减小(p<0.01)。镉暴露组蛋壳中的钙含量发生显著下降(p<0.05),镉含量在镉暴露组与对照组之间不存在显著差异(p>0.05)。扫描电镜观察发现镉暴露组卵壳总厚度明显变薄,表面结晶层厚度变薄,壳膜厚度厚度没有明显的变化,乳突大小不一,可观察到畸形乳突。这表明镉暴露会影响蛋壳中钙沉积的过程。

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