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基于稳定同位素技术分析不同蛋白源对大菱鲆(Scophthalmus maximus L.)生长和蛋白质周转的影响

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引言

第一章 综述:基于稳定同位素技术的鲆鲽鱼类蛋白质周转代谢机理研究

1蛋白质周转代谢的基本概述

1.1蛋白质代谢动力学基本术语

1.2蛋白质周转代谢(Protein turnover)的定义

1.3 影响蛋白质周转代谢的因素

2 蛋白质周转代谢的研究方法

2.1稳定同位素简述

2.2蛋白质周转代谢的研究方法及其原理

2.3基于稳定同位素技术的蛋白质周转代谢机理研究

3稳定同位素示踪蛋白质周转代谢在鲆鲽类鱼类上的应用展望

4小结

第二章 基于稳定同位素技术分析玉米蛋白在大菱鲆体内的周转利用

1材料与方法

1.1实验设计

1.2饲养管理

1.3样品采集与生长指标计算

1.4天然稳定同位素测定

1.5基于时间的氮同位素周转模型

1.6氮稳定同位素混合模型

1.7数据统计分析

2结果

2.1生长性能和饲料利用情况

2.2摄食各组饲料对大菱鲆体成分的影响

2.3摄食各组饲料对大菱鲆氨基酸成分的影响

2.4不同体组织δ15N值随时间变动情况

2.5生长作用、代谢作用与氮同位素的周转

2.6氮稳定同位素的周转半衰期和分馏系数

2.7不同蛋白源对大菱鲆生长的贡献率

3讨论

4小结

第三章 基于稳定同位素分析玉米蛋白和大豆浓缩蛋白混合蛋白源在大菱鲆体内的周转利用

1材料与方法

1.1实验设计

1.2饲养管理

1.3样品采集与生长指标计算

1.4天然稳定同位素测定

1.5基于时间的氮同位素周转模型

1.6数据统计分析

2结果

2.1生长和饲料利用情况

2.2摄食各组饲料对大菱鲆体成分的影响

2.3摄食各组饲料对大菱鲆氨基酸成分的影响

2.4体组织δ15N值随时间变动情况

2.5生长作用和代谢作用对大菱鲆体组织中氮同位素周转的驱动

2.6氮同位素的周转半衰期和分馏系数

2.7不同蛋白源对大菱鲆生长的贡献比例

3讨论

4小结

结论

参考文献

硕士期间发表论文

致谢

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摘要

本研究以初始体重为57.72g左右的大菱鲆(Scophthalmus maximus L.)幼鱼为研究对象,采用玉米蛋白和大豆浓缩蛋白(soy protein concentrate,SPC)按不同比例替代大菱鲆饲料中的鱼粉蛋白,来探索其单一的植物蛋白源(玉米蛋白)和混合的植物蛋白源(玉米蛋白和大豆浓缩蛋白)对大菱鲆幼鱼生长性能、饲料利用、体组成的影响,并利用稳定同位素技术探究氮稳定同位素在大菱鲆幼鱼体组织中的周转变动情况,评估鱼粉蛋白、玉米蛋白和大豆浓缩蛋白对大菱鲆幼鱼的生长贡献。主要研究结果如下: 本实验采用玉米蛋白在等氮的基础上替代大菱鲆幼鱼饲料中的鱼粉蛋白,通过测定不同饲料组和体组织中氮稳定同位素的值,评估氮稳定同位素的周转以及生长作用和代谢作用对大菱鲆体组织中氮稳定同位素周转的贡献比例。实验设计了4种配合饲料,在等氮等能基础上以混合植物蛋白分别替代饲料中0%、10%、30%、50%的鱼粉蛋白,即C0、C10、C30、C50。将初始体重为57.72±0.25g的大菱鲆分成4组,每组3个平行,实验周期为56天。实验开始后的第7天、14天、28天、42天和56天采集并测定大菱鲆肌肉和肝脏中氮稳定同位素值(δ15N)。研究结果表明,当替代量达30%时,大菱鲆摄食率和特定生长率显著低于其他组(P<0.05),而饲料系数显著高于其它组(P<0.05)。不同实验组间氮同位素的周转率均存在显著性差异(P<0.05),对照组的周转速度最快。各实验组肝脏的周转率均显著快于肌肉(P<0.05)。大菱鲆肌肉中氮同位素的周转半衰期(23.96~45.37天)显著高于肝脏的(12.38~20.31天)(P<0.05)。基于时间的周转模型估算氮同位素分馏系数为1.83‰~3.25‰。研究表明,代谢作用对大菱鲆肌肉氮同位素周转的贡献比例为26.67%~42.67%,而对肝脏的贡献比例为63.90%~70.83%。基于稳定同位素混合模型得出,C10、C30和C50组中鱼粉和玉米蛋白两种蛋白源对大菱鲆生长的贡献比例分别为94.32%和5.67%、81.26%和18.74%、59.46%和40.66%。 本实验采用混合植物蛋白(玉米蛋白和大豆浓缩蛋白等氮1:1混合)替代鱼粉蛋白投喂大菱鲆,通过测定不同饲料组和体组织中氮稳定同位素的值,估算氮同位素的周转率及不同蛋白源对大菱鲆生长的贡献比例。实验设计了4种配合饲料,在等氮等能的基础上,以混合植物蛋白分别替代饲料中0%、10%、30%、50%的鱼粉蛋白,即CS0、CS10、CS30、CS50。将初始体重为57.72±0.25g的大菱鲆分成4组,每组设3个平行,实验周期为56天。实验开始后的第7天、14天、28天、42天和56天采集并测定大菱鲆肌肉和肝脏中氮稳定同位素值(δ15N)。研究结果表明,当替代量达到50%时,大菱鲆摄食率和特定生长率显著低于其他组(P<0.05),而饲料系数显著高于其它组(P<0.05)。不同实验组间氮同位素的周转率均存在显著性差异(P<0.05),对照组的周转速度最快。各实验组肝脏的周转率均显著快于肌肉(P<0.05)。大菱鲆肌肉中氮同位素的周转半衰期(23.96~32.42天)显著高于肝脏的(12.38~16.83天)(P<0.05)。生长作用对大菱鲆肌肉氮同位素周转的贡献比例为57.33%~73.33%,而对肝脏的贡献比例为29.17%~36.10%。基于时间的周转模型估算氮同位素分馏系数(Δ)为1.83‰~2.83‰。采用Isosource软件计算显示,CS10、CS30和CS50组中鱼粉、玉米蛋白和SPC三种蛋白源对大菱鲆生长的贡献比例分别为80%、7%和13%,62%、11%和27%,46%、13%和41%。

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