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鲣的种群遗传学及金枪鱼类系统进化研究

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第一章 引 言

1.1 鱼类mtDNA的研究

1.2 金枪鱼类的简介及研究概况

1.3 鲣的资源状况及研究概况

1.4研究的目的和意义

第二章 鲣的遗传多样性研究:线粒体Cytb基因分析

2.1 材料与方法

2.2 实验结果

2.3 讨论

第三章 鲣的遗传多样性研究:线粒体D-loop区序列分析

3.1 材料与方法

3.2 实验结果

3.3 讨论

第四章 长鳍金枪鱼线粒体全基因组序列的测定和结构分析

4.1 材料和方法

4.2 结果与分析

4.3 讨论

第五章 基于线粒体全基因组序列对金枪鱼类系统进化的研究

5.1 实验材料与方法

5.2 结果与分析

5.3 讨论

小结

参考文献

附录

致谢

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摘要

金枪鱼类(Tunas)是高度洄游的大洋鱼类,一般是指金枪鱼族(Thunnini)鱼类,在分类学上隶属于鲈形目(Perciformes),鲭科(Scombridae)。本研究测定了圆舵鲣、扁舵鲣、长鳍金枪鱼和黄鳍金枪鱼的线粒体基因组的全序列,其中,选取长鳍金枪鱼线粒体全基因组序列作具体结构分析,并基于13种金枪鱼类的全序列作系统进化分析,为金枪鱼类的系统分类和物种鉴定提供新的科学依据。另外,鲣(Katsuwonus pelamis),作为重要的经济金枪鱼之一,本研究还通过Cytb基因和控制区序列对12个鲣群体进行分析,以期为渔业的有效管理提供重要的基础数据。 1、鲣的遗传多样性研究:线粒体Cytb基因分析 本研究通过Sanger测序得到92个鲣个体的Cytb基因序列,与GenBank数据库中的139个个体序列一起作分析,共获得205个单倍型;种群S17、HN、S19、NSX、S21单倍型多样性最高,S1最低;核苷酸多样性最低的是NSA群体,最高的是HN群体;Cytb基因序列的第1017个碱基为G,则其第1020个碱基为A的概率较高;Kimura双参数模型评估种群间和种群内的遗传进化分歧,S19的进化分歧最大;NJ树显示,12个群体分为两个类群,其中,S19群体形成一个单系类群,其他群体共同构成另一个单系类群;Tajima’s D中性检验显示,群体S19、KS、S14、NSF显著偏离平衡;Fu's Fs检验显示,11个群体(HN群体除外)均显著偏离中性平衡;错配分布图均呈多峰,表明这11个鲣群体(HN群体除外)均未经历过近期的种群扩张。 2、鲣的遗传多样性研究:线粒体D-loop序列分析 本研究共测得92尾鲣的控制区序列,将之与NCBI下载的139个个体序列一起作分析。结果显示,共有238个单倍型;核苷酸多样性S14最高;KS群体远远偏离拟合h-S的方程曲线,且在曲线下方;种群内进化分歧S14群体最大,HN最小,种群间遗传距离最大的是S14与S21以及S11与S14;NJ树显示,S14群体单独成一支,其他11个群体为一支;错配分布图均呈多峰,说明这11个鲣群体近期均未经历种群扩张。 3、长鳍金枪鱼线粒体全基因组序列的测定和结构分析 设计13对引物测得长鳍金枪鱼的线粒体序列全长16527bp,包括13个编码蛋白质或蛋白亚单位的基因、2个编码rRNA基因,22个编码tRNA基因,2个非编码区;各碱基含量分别是:A为28.37%,G为16.69%,T为25.46%,C为29.49%,碱基G的含量相对较低,有反G偏倚现象;各编码蛋白质或亚基基因的序列和控制区序列中,G碱基含量为11.90%(ATP8)~18.50%(COXI),G碱基含量明显偏低;编码蛋白质或亚单位的基因序列、编码tRNA的基因序列、编码rRNA基因序列以及D-loop区序列都具有明显的AT偏好性,特别是D-loop区序列,AT含量高达62.08%;编码蛋白质或亚单位的基因中,仅COXI基因的起始密码子为GTG,其他均为ATG。终止密码子有3种:有9个基因的终止密码子为TAA;有2个基因(COXII,ND4)是不完全密码子T;有一个基因(ND6)的终止密码子为TAG;序列中存在明显的基因重叠现象;与另一长鳍金枪鱼序列比对,统计两条序列的差异位点共95个,主要分布于D-loop区序列、编码16S rRNA的基因序列和12个编码蛋白质或蛋白亚单位的基因序列(不包括 ATP8基因),差异比最大的是D-loop区的序列。 4、基于线粒体全基因组序列对金枪鱼类系统进化的研究 本研究测得圆舵鲣、扁舵鲣、长鳍金枪鱼、黄鳍金枪鱼四种金枪鱼mtDNA全序列,又从GenBank数据库下载了其他9种金枪鱼线粒体基因组全序列一起分析,发现G+C含量高于47%的四种鱼,均生活在热带水域;其中,生活在温带水域的南方蓝鳍金枪鱼,G+C含量仅为46%。热带和亚热带鱼G+C含量较高,可能与它们的生活环境有关。基于 GTR+G+I的最适模型构建的 ML系统进化树,和基于Kimura双参数模型构建的NJ树,均表明这13种金枪鱼类可分为2个大支,其中,金枪鱼属8种鱼类构成一支,支持率为100%;鲔属、鲣属和舵鲣属构成另外一支,支持率为100%;长鳍金枪鱼和太平洋蓝鳍金枪鱼互为姐妹种,置信度为100%。

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