中药黄酮类成分的红外提取工艺优化及其抗氧化活性研究

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黄酮类化合物广泛存在于药用植物中，已用于治疗多种慢性疾病，如高血压、糖尿病及动脉粥硬化等。目前就黄酮类成分的有效提取研究，以解决其提取过程中费用昂贵、操作复杂、耗时、耗剂等问题为关键所在。为此，探索一条绿色环保、高效、经济的方法是非常重要的，故本研究以富含黄酮类化合物的葛根、黄芪、槐花、黄芩作为模式饮片进行了探索性研究。对影响黄酮提取效率的提取时间、提取溶剂、料液比和功率等因素运用单因素结合Box-Behnken响应面设计法（BBD-RSM）进行筛选，确定最佳的红外提取工艺，并采用超高效液相色谱（UPLC）法建立快速同步测定饮片中多种黄酮类成分含量的方法。最终由红外辅助法、超声法、回流法测定不同饮片中总黄酮含量，结合氧自由基吸收能力（ORAC）和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）来评价红外法和传统法的优劣，通过总黄酮含量与抗氧化活性更加全面、可靠筛选了提取工艺。研究结果如下：
　　（1）UPLC定量方法的建立
　　采用UPLC对中药材的流动相、色谱条件及方法学进行研究。根据饮片中多种黄酮类成分的性质，筛选出分离度好、出峰时间快、峰型与峰面积好的甲酸，乙腈流动相梯度与最佳的柱温、检测波长、流速等色谱条件。并结合方法学的考察结果建立了四种饮片定量分析方法。各考察结果均达到标准要求，且仪器性能良好，红外辅助方法稳定可靠，各项结果表明可进行各饮片的有效成分含量测定和进一步研究。
　　（2）红外辅助和传统提取研究
　　运用红外辅助法对各饮片一的料液比，提取时间，提取功率等进行单因素筛选，并通过BBD-响应面法对影响大的因素进行进一步优化，最终得红外辅助提取总黄酮最佳提取工艺。最佳条件下各药材总黄酮含量分别为：黄芪的总黄酮含量为0.575mg/g，葛根的总黄酮含量为34.61mg/g，槐花的总黄酮的含量为33.199mg/g，黄芩的总黄酮的含量为174.794mg/g。同时以传统提取法（超声提取，回流提取）提取各饮片中总黄酮含量，其分别对应的最高含量分别为1.142，40.73，30.217，182.695mg/g，由结果显示，表明不同提取方法除黄芪外其含量相差较少，黄芪传统提取法含量约为红外的2倍。
　　（3）抗氧化活性研究
　　分别测定各饮片的ORAC值与DPPH值，在最佳红外辅助提取条件下，黄芪、葛根、槐花、黄芩的抗氧能力ORAC值分别为：6576.203±553、5824.016±575、3785.827±518、1603.197±78μmoL/g，清除活性DPPH值分别为110.83、32.50、53.44、88.49μg/mL。传统提取方法对应的最高ORAC值分别为：3428.050±391、3362.656±284、2983.864±232、2300.137±78μmoL/g，DPPH值：84.13，64.33，70.2，74.46μg/mL。由结果知，红外辅助提取的氧化活性整体强于传统提取方法，且黄芪红外提取的氧化活性是传统的2倍。
　　本实验建立了以UPLC同时测定多种黄酮类的定量分析方法，并通过活性研究表明四种饮片的不同提取方法均有一定活性。以上研究结果表明红外辅助提取的效率高于传统提取，在含量与活性研究上，其整体优于传统，具有高效、经济、环保、绿色等特点，可用于之后提取工艺的研究。且通过含量与活性研究可知，采用这两种方法共同评价提取方法更加合理客观，避免了单方面片面的评价，使红外辅助法更好的用于研究。本实验可为之后红外辅助提取黄酮类成分，含量和活性研究奠定基础。

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作者
贺敬霞;
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作者单位

成都中医药大学;

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授予单位成都中医药大学;
学科药剂学
授予学位硕士
导师姓名尹蓉莉;
年度 2017
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类有效成分的分离与提取;
关键词
中药材; 黄酮类成分; 红外辅助法; 提取工艺; 抗氧化活性; 超高效液相色谱; 含量测定;

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