防风-乌梅配伍对肥大细胞蛋白酶激活受体表达和介质分泌的影响

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目的：研究药对防风、乌梅配伍在体外对肥大细胞蛋白酶激活受体表达以及相关介质分泌，其信号通路的影响，探索该药对抗过敏机制，提供药对配伍的科学依据，为下一步研究提供依据。
　　方法：在体外采用胰蛋白酶刺激小鼠肥大细胞株P815建立肥大细胞脱颗粒模型，通过MTT、RT-PCR、Western blotting方法、ELISA等观察防风、乌梅配伍对肥大细胞细胞毒性和蛋白酶激活受体表达的影响；防风、乌梅配伍对P815细胞分泌组胺和Th2类细胞因子影响；防风、乌梅配伍对肥大细胞分泌细胞因子相关信号传导通路的影响。
　　结果：
　　1、防风、乌梅、防风和乌梅配伍提取物对P815细胞的细胞毒作用，乌梅最强，防风次之，乌梅和防风配伍最弱。
　　2、防风、乌梅、防风和乌梅配伍提取物均可降低胰蛋白酶刺激的P815细胞中PAR-2mRNA和蛋白表达（P<0.05或P<0.01），抑制强度依次为防风和乌梅配伍组、乌梅组、防风组，且呈现出浓度依赖性。
　　3、防风、乌梅、防风乌梅配伍提取物均对胰蛋白酶刺激的P815细胞有明显的抑制组胺的分泌的作用（P<0.05或P<0.01）；乌梅、防风和乌梅配伍提取物对胰蛋白酶刺激的P815细胞分泌IL-4有明显的影响抑制作用（P<0.05或P<0.01）；抑制分泌组胺和IL-4作用防风和乌梅配伍提取物尤为明显；防风、乌梅和防风乌梅配伍提取物均对IL-13无抑制作用(P＞0.05)。
　　4、乌梅、防风和乌梅配伍提取物对胰蛋白酶刺激的P815细胞AKT有明显的抑制作用（P<0.05）；防风、乌梅、防风和乌梅配伍提取物对胰蛋白酶刺激的P815细胞ERK有明显的抑制作用（P<0.05或P<0.01），同时，防风和乌梅配伍提取物表现相对于其他组抑制作用明显。
　　结论：
　　1、防风、乌梅、防风和乌梅的配伍在体外抑制肥大细胞表面PAR-2表达；抑制分泌Th2细胞因子IL-4，其信号通路可能与AKT、ERK信号途径有关。
　　2、防风、乌梅、防风和乌梅的配伍可抑制肥大细胞脱颗粒，其机制可能与阻断肥大细胞脱颗粒自身放大信号中关键分子PAR-2、IL-4、HA等有关。
　　3、防风和乌梅配伍减轻药物对细胞的毒性作用，并可增大抑制肥大细胞PAR-2表达、分泌组胺和IL-4，提示防风和乌梅配伍具有“减毒增效”作用。

著录项

作者
吴贤波;
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作者单位

成都中医药大学;

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授予单位成都中医药大学;
学科中西医结合基础
授予学位博士
导师姓名高永翔;
年度 2013
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类方论;中药实验药理;
关键词
防风; 乌梅; 药对配伍; 肥大细胞; 蛋白酶激活受体; 抗过敏机制;

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