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【6h】

法医昆虫种属鉴定的分子生物学方法研究

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目录

前言

第一部分:嗜尸性苍蝇的DNA分析的方法学初探

1材料与方法

2结果

3讨论

参考文献

第二部分:不同地区不同种类嗜尸性苍蝇16srRNA基因序列变异分析

1材料与方法

2结果

2.116srRNA基因测序结果1

2.116srRNA基因测序结果2

2.2由16srRNA基因序列获得的遗传距离

2.3利用16srRNA基因构建化树结果

3讨论

参考文献

第三部分:种属特性异性微卫星遗传标记在法医昆虫学中的初步研究

1材料与方法

2结果

3讨论

参考文献

结论

综述:分子生物学技术在法医昆虫学中的应用

1不同的分子生物学方法

2分子生物学方法在法医昆虫学中的主要研究内容

3分子生物学技术在昆虫分类鉴定研究中的优点及应用前景

参考文献

研究生简历

附录目录

附录1:十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)/氯仿法提取DNA

附录2:非变聚丙烯酰胺凝胶电泳

附录3:银染法显色

附录4:应用紫外分光光度计定量DNA

致谢

声明

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摘要

[目的本课题旨在探索新的法医昆虫学种属鉴定方法。方法利用引物设计软件分别对法医常见昆虫的常染色体微卫星区域和线粒体DNA(mtDNA)进行引物设计,使用PCR技术分别对其进行扩增,用聚丙烯酰胺电泳对PCR产物分离、银染。对于微卫星(microsatellite)遗传标记直接进行分型检测。对于线粒体DNA通过银染分离、检测,利用DNA测序仪进行测序分析。用系统进化软件(Mega2.1和PHYLIP3.06)进行法医常见昆虫的亲缘关系分析。结果采用对线粒体16rsRNA基因进行PCR扩增和DNA测序的方法,我们得到了中国9个地区6种不同法医常见昆虫的该基因测序结果。通过分子进化关系分析,我们得到了他们之间的亲缘关系图。对于微卫星遗传标记,我们发现了具有舍蝇种属特异的微卫星,并通过分子进化关系分析了三个地区舍蝇的近缘关系。结论基于不同的遗传标记,我们建立了两种用于法医昆虫学种属鉴定的体系。比较了两种遗传标记对法医常见嗜尸性苍蝇种属鉴定的特点,提示两种遗传标记可以用于法医常见昆虫的种属鉴定,为法医鉴别嗜尸性蝇类种属的提供了可供选择的新方法。

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