学习经历对川硬皮肿腿蜂气味结合蛋白表达的影响

声明

摘要

1 文献综述

1．1 川硬皮肿腿蜂研究进展

1．2 寄生蜂寄主搜索过程中的学习行为

1．3 昆虫嗅觉反应机理

1．3．1 昆虫的嗅觉感器及气味引起的行为的神经机制

1．3．2 昆虫嗅觉相关蛋白

1．4 实时荧光定量PCR技术

1．4．1 荧光定量PCR技术简介

1．4．2 实时荧光定量PCR在昆虫研究中的应用、

2 研究目的与意义

3 技术路线

4 研究内容

4．1 供试材料

4．2 不同日龄川硬皮肿腿蜂对云斑天牛虫粪木屑混合物的行为反应

4．2．1 学习处理

4．2．2 行为反应生测

4．2．3 数据统计与分析

4．3 川硬皮肿腿蜂OBPs及β-actin片段的基因克隆

4．3．1 主要试剂

4．3．2 川硬皮肿腿蜂头部RNA提取

4．3．3 凝胶电泳检测RNA质量

4．3．4 cDNA第一链的合成

4．3．5 引物设计与合成

4．3．6 PCR扩增

4．3．7 PCR产物回收

4．3．8 PCR产物的TA克隆及测序

4．3．9 序列分析

4．4 川硬皮肿腿蜂OBPs不同部位的表达

4．4．1 供式材料

4．4．2 主要试剂

4．4．3 川硬皮肿腿蜂各部位总RNA提取及检测

4．4．4 cDNA第一链的合成

4．4．5 引物设计及合成

4．4．6 实时荧光定量PCR(Real Time PCR)

4．5 不同日龄及经历的川硬皮肿腿蜂OBP基因的转录表达研究

4．5．1 供式材料

4．5．2 主要试剂

4．5．3 川硬皮肿腿蜂头部总RNA提取及检测

4．5．4 cDNA第一链的合成

4．5．5 引物设计及合成

4．5．6 实时荧光定量PCR(Real Time PCR)

5 结果与分析

5．1 不同日龄川硬皮肿腿蜂对爱斑爨昝虫粪木屑混合物的学习效应

5．1．1 不同日龄川硬皮肿腿蜂对云斑天牛虫粪木屑混合物的行为反应

5．1．2 川硬皮肿腿蜂的学习效应

5．2 川硬皮肿腿蜂OBPs基因克隆

5．2．1 OBPs基因的扩增、克隆与鉴定

5．2．2 川硬皮肿腿蜂OBPs的基因序列分析

5．2．3 川硬皮肿腿蜂OBPs与其它昆虫的OBPs氨基酸序列同源性分析

5．2．4 气味结合蛋白质结构分析

5．3 川硬皮肿腿蜂OBPs在不同组织的表达

5．3．1 川硬皮肿腿蜂不同组织总RNA检测

5．3．2 目的基因和内参基因扩增效率一致性检验

5．3．3 川硬皮肿腿蜂OBPs在成虫各组织的表达

5．4 不同日龄及经历的川硬皮肿腿蜂OBPs基因的转录表达研究

5．4．1 不同日龄及经历川硬皮肿腿蜂头部和触角总RNA检测

5．4．2 不同日龄及经历的川硬皮肿腿蜂OBPs基因的表达

6 结论与讨论

6．1 不同日龄川硬皮肿腿蜂对云斑天牛虫粪木屑混合物的学习效应

6．2 川硬皮肿腿蜂OBPs基因克隆及序列分析

6．3 川硬皮肿腿蜂OBPs在成虫各组织的表达

6．4 不同日龄及经历的川硬皮肿腿蜂OBPs基因的转录表达研究

参考文献

致谢

附录