鱿鱼皮胶原蛋白原合肽的制备及其抗氧化和抗衰老活性的研究

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衰老是生命有机体的自然规律，是生物体全身各组织、器官的退行性变化，是诸多生理、病理过程综合作用的结果。抗衰老活性肽是指能够抗氧化，清除自由基，改善体质，增强免疫力，提高生命效率，使生命在遗传特性决定的限度内延长寿限的肽类物质。胶原蛋白是一类重要的结构蛋白，广泛存在于多细胞动物的骨骼、表皮和肌腱等支持组织中。胶原蛋白中含有丰富的甘氨酸、脯氨酸及羟脯氨酸，其水解产物中还存在有生理活性肽，被广泛地应用在在医疗、保健及美容等方面。本文以采用胃蛋白酶促溶(5℃，72h)的方法从鱿鱼皮中提取纯化的胶原蛋白为研究对象，共分为四章分别对胶原蛋白活性肽的制备方法、抗氧化和抗衰老功效评价、分级纯化与理化特性、功能特性以及应用前景进行了研究和探讨。所取得的研究成果主要体现在以下方面：
　　 1.分别采用胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶对胶原蛋白进行酶解，以抗氧化活性为指标筛选出制备胶原蛋白复合肽的最佳工艺条件，并在相应条件下制备出三种活性肽，经4℃条件下透析72h，即胶原蛋白复合肽Ⅰ(胰蛋白酶，50℃，pH8.0，20mins)、复合肽Ⅱ(胃蛋白酶，37℃，pH2.0，40mins)和复合肽Ⅲ(木瓜蛋白酶，55℃，pH7.0，40mins)。
　　 2.采用动物实验模型，对三种胶原蛋白复合肽的抗氧化和抗衰老功效进行了评价。经果蝇寿命实验表明，鱼皮胶原活性肽能显著延长果蝇的寿命，果蝇的最高寿命由对照组的60天提高到实验组的84天，其延寿功效达到同浓度维生素E的94％。其延寿的机理同其抗氧化活性有关，经鱼皮胶原活性肽饲养的果蝇，其脂褐质含量明显低于对照组，功效达到相同剂量维生素E的89％。同时，体外实验也显示，三种目标肽具有很强的抗氧化作用，当其浓度为2和5 mg/ml时，对多酚氧化酶的抑制率可达同浓度维生素C的65％和100％；对超氧阴离子和DPPH自由基也有一定的抑制作用，其抑制率为35％和60％。
　　 3.采用葡聚糖凝胶层析法(Sephadex G-50，68×1.5cm)，对透析后的3种复合肽进行分级纯化，筛选出具有较高抑制活力的三种活性肽，分别是y2，w1和m4.用SDS-PAGE凝胶电泳方法得到了三种图谱清晰的单一条带.测得w1的分子量为12056.5D；m4的分子量为9078.6D；y2的分子量为7376.9D。最后测定了三种活性肽的氨基酸组成。
　　 4.对三种复合肽的功能特性进行了比较，在溶解性方面，胶原蛋白为39.2％，而复合肽都在98％以上，复合肽优于胶原蛋白，在吸水性、湿润性和吸油性，复合肽也皆强于胶原蛋白；而在保水性、乳化性、起泡性和凝胶性方面发现复合肽可以广泛应用在食品添加剂和化妆品中.
　　以上研究结果表明，通过不同的蛋白酶对鱿鱼皮胶原蛋白进行酶解，可以获得不同的胶原蛋白活性肽，这些活性肽均具有清除自由基、显著延长果蝇寿命、抑制多酚氧化酶活性以及抑制体内脂褐质生成的功效，有望开发成各种保健美容产品。

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作者
彭德翔;
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作者单位

上海海洋大学;

上海水产大学;

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授予单位上海海洋大学;上海水产大学;
学科水产品加工及贮藏工程
授予学位硕士
导师姓名刘承初;
年度 2006
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类水产副产品加工及利用;
关键词
鱿鱼皮; 胶原蛋白; 活性肽; 抗氧化性; 抗衰老活性;

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