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第一部分:前言
一、苏云金芽孢杆菌简介
二、苏云金芽孢杆菌ICP蛋白及其编码基因
三、苏云金芽孢杆菌菌株的分离鉴定
四、苏云金芽孢杆菌的遗传改良工作
五、抗性问题
六、关于crylC基因
七、本文的研究目的与意义
第二部分:材料和方法
一、实验材料
1.1菌株及培养条件
1.2试剂
1.3主要仪器
二、实验方法
2.1 PCR模板的制备及扩增体系
2.2质粒的提取及检测
2.3生物测定
2.4 H血清型鉴定
2.5 PCR产物的克隆
2.6外源片断的亚克隆
2.7Bt菌株的电穿孔转化
2.8 Bt晶体蛋白的SDS-聚丙烯凝胶电泳检测
第三部分:结果与分析
一、Bt 15A3菌株的血清定
二、Bt 15A3菌中全长crylC基因的克隆
三、crylC基因在无晶体Bt菌株中的表达
3.1电击转化无晶体Bt菌株1715
3.2电转化Bt 3#消晶体株Bt 3#(Cry-)
四、多功能基因工程菌的构建
4.1以Bc 9509为受体构建转crylC基因工程菌
4.2以3#菌株为受体转crylC基因工程菌的构建
4.3以Bt subsp.kenyae 7404为受体进行工程菌的构建
第四部分、讨论
一、以T-vector为载体克隆PCR产物
二、全长crylC基因的克隆
三、影响电转化效率的因素
四、以增产菌Bc 9509为受体构建双价工程菌
五、转crylC基因菌株的毒力
第五部分、小结
参考文献
致谢
附表