大白菜干烧心病致病过程中基因表达序列标签(EST)分析

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第一章 绪论

1.1差异表达基因的研究方法及其应用

1.1.1消减杂交(SH)

1.1.2差异显示技术(DDRT-PCR)

1.1.3 cDNA代表性差异分析(cDNA-RDA)

1.1.4 cDNA-AFLP技术

1.1.5抑制差减杂交(SSH)技术

1.2大白菜干烧心病研究进展

1.2.1大白菜干烧心病发病症状表现

1.2.2大白菜干烧心病发病机理研究

1.2.3大白菜干烧心生理生化变化的研究

1.2.4大白菜干烧心发生过程中叶片超微结构及心叶中钙分布的变化

1.2.5大白菜干烧心病鉴定方法研究

1.2.6大白菜干烧心病抗性与品种关系的研究

1.2.7大白菜干烧心病防治措施的研究

1.3钙对植物生理代谢及功能影响的研究进展

1.3.1钙对细胞膜系统微结构的影响

1.3.2钙对植物细胞壁结构的影响

1.3.3钙的第二信使作用

1.3.4钙对光合系统的影响

1.3.5蛋白质代谢

1.3.6活性氧代谢与膜质过氧化

1.4研究目的及内容

第二章 大白菜资源抗干烧心病鉴定研究

2.1材料与方法

2.1.1材料

2.1.2方法

2.2结果和分析

2.2.1干烧心病记载标准及病情指数计算

2.2.2不同浓度的EDTA-Na2溶液培养对大白菜离体叶片干烧心发生的影响

2.2.3离体叶片扦插鉴定试验

2.3讨论

第三章 大白菜干烧心病致病过程中基因表达序列标签(EST)分析

3.1材料与处理

3.2大白菜干烧心致病过程中抑制差减文库的构建

3.2.1大白菜总RNA的提取

3.2.2 Poly(A)RNA的分离

3.2.3抑制差减杂交(SSH)

3.2.4差减cDNA文库的构建(T／A克隆法)

3.2.5差异筛选差减cDNA文库

3.2.6 cDNA片段的测序和序列分析

3.3结果与分析

3.3.1 RNA的提取和mRNA的纯化

3.3.2双链cDNA和合成与Rsa Ⅰ酶切效率分析

3.3.3消减杂交后两轮PCR扩增产物结果分析

3.3.4差减cDNA文库构建及差异筛选

3.3.5差异表达基因的EST序列分析

3.4讨论

3.4.1 SSH cDNA文库的质量

3.4.2缺钙胁迫下抑制差减杂交文库的特点

第四章 结论

参考文献

发表论文和科研情况说明

致 谢