瑞巴派特通过抑制内质网应激和激活自噬通路减轻乙醇过度刺激诱导的胃上皮细胞凋亡

代理获取

页面导航

摘要
著录项
相似文献
相关主题

摘要

目的:酒精滥用诱导的胃黏膜上皮细胞凋亡是胃粘膜损伤和急慢性胃炎的重要原因.近年来发现内质网应激在介导细胞凋亡中起到了重要作用,而自噬及相关通路是保护细胞的一种重要机制.也有研究发现瑞巴派特可有效保护胃黏膜,主要通过抑制白细胞活化及炎性细胞因子产生、清除氧自由基、增加胃粘液量及胃黏膜前列腺素等机制.本研究拟探索乙醇过度刺激胃黏膜上皮细胞是否激活内质网应激并诱导细胞凋亡.并进一步深入研究瑞巴派特是否可通过抑制内质网应激及激活自噬通路减轻乙醇过度刺激诱导的胃黏膜上皮细胞凋亡,以期找到瑞巴派特新的作用途径,揭示新的作用机制,为瑞巴派特在临床应用提供更有力的理论依据. 方法:以胃黏膜上皮细胞系GES-1为主要研究对象,以乙醇造模,以及瑞巴派特给药干预.通过流式AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;通过装有JC-1探针流式细胞术检测线粒体膜电位(Δψ)的变化;通过Western blot检测细胞凋亡、内质网应激以及自噬相关蛋白的表达水平.通过荧光显微镜观察自噬相关蛋白的变化. 结果:1.乙醇可诱导GES-1细胞凋亡且呈浓度依赖性方式.乙醇处理后凋亡相关蛋白cleaved caspase3、CHOP、Bax表达水平明显升高,Bcl-2表达水平明显下降,而caspase8表达水平无统计学差异;Δψ呈明显下降.瑞巴派特有效降低了cleaved caspase3、CHOP、Bax蛋白表达水平,恢复了Bcl-2蛋白表达水平,部分恢复了Δψ的水平.2.乙醇可诱导GES-1产生内质网应激,显著增加了ATF6蛋白表达,增加了p-IREα的磷酸化水平,对p-eIF2α的磷酸化没有明显作用.瑞巴派特干预后,降低了ATF6蛋白表达水平,降低了p-IREα的磷酸化水平.同时,乙醇处理后内质网应激下游通路NF-κB和IκBα蛋白表达水平明显下降,瑞巴派特干预后恢复了NF-κB和IκBα蛋白表达水平.3.对自噬通路相关蛋白进一步研究发现,与乙醇单独作用相比,瑞巴派特干预后P62蛋白表达水平明显降低,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ自噬流明显增加,自噬相关蛋白Atg5和Atg7的表达水平明显增加,对Beclin1蛋白表达水平无影响.通过转染GFP-LC3质粒,发现乙醇处理后GFP-LC3斑点的数量无明显改变;瑞巴派特干预后可明显增加GFP-LC3斑点的数量.自噬抑制剂3-MA可抑制瑞巴派特的自噬激活作用.4.对自噬上游信号通路进一步研究发现,与乙醇单独作用相比,瑞巴派特干预后可明显增加p-ERK和p-p38的磷酸化水平,对p-JNK和p-mTOR的磷酸化水平无影响. 结论:乙醇过度刺激胃黏膜上皮细胞可激活内质网应激并诱导细胞凋亡,且无法激活自身自噬通路.瑞巴派特通过降低cleaved caspase3、CHOP、Bax且恢复Bcl-2蛋白表达水平有效抑制细胞凋亡;通过降低ATF6蛋白表达水平和p-IREα的磷酸化水平有效抑制内质网应激激活;通过降低P62蛋白表达水平,增加LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ自噬流,增加自噬相关蛋白Atg5和Atg7的表达水平,增加GFP-LC3斑点的数量有效激活自噬相关通路;通过增加p-ERK和p-p38的磷酸化水平激活自噬上游信号通路.因此,瑞巴派特可有效减轻乙醇过度刺激诱导的胃上皮细胞凋亡.进一步推测,瑞巴派特与损伤胃黏膜药物联合应用可以有效保护胃黏膜.

著录项

作者
刘梦静;
展开▼
作者单位

天津医科大学;

展开▼
授予单位天津医科大学;
学科内科学消化系病
授予学位硕士
导师姓名姜葵;
年度 2018
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类药品;药典、药方集（处方集）、药物鉴定;
关键词
瑞巴派特; 抑制; 内质网应激; 激活; 通路; 乙醇; 过度刺激; 诱导;

相似文献

中文文献
外文文献
专利

瑞巴派特通过抑制内质网应激和激活自噬通路减轻乙醇过度刺激诱导的胃上皮细胞凋亡

摘要

著录项

相似文献

相关主题

期刊订阅