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溶出伏安法测定血清中VK3、纳米银溶出Ag+

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摘要

目的：
　　建立一种快速、准确、灵敏的测定血清中维生素K3(VK3)的电化学方法，确定血清中VK3的医学参考值范围；合成纳米银并以4-叔丁基-1-(乙氧基羰基甲氧基)硫杯[4]芳烃(4-tert-Buty1-1(Ethoxycarbonylmethoxy)Thiacalix[4]Arene；TAC)修饰的玻碳电极为工作电极测定纳米银溶出Ag+的含量。
　　方法：
　　1、VK3的检测方法：镀汞膜修饰玻碳电极为工作电极，Ag/AgCl电极为参比电极，铂片电极为辅助电极，组成三电极体系，在pH=1.0、浓度为1.0mol·L-1氨水-氯化铵缓冲液的底液中，用差分脉冲溶出伏安法对血清中VK3进行测定；
　　2、纳米银颗粒溶出Ag+的检测方法：采用二次还原法制备纳米银颗粒；TAC修饰玻碳电极为工作电极，饱和甘汞电极为参比电极，铂片电极为辅助电极，组成三电极体系，在pH4.5的B-Rbuffer底液中，用差分脉冲溶出伏安法对纳米银颗粒溶出Ag+进行测定。
　　结果：
　　1、峰电流(ip)与VK3的浓度(C)在0.23～1.6ng·mL-1范围内呈现良好的线性关系，检出限为0.23ng·mL-1，并具有很好的平行性，对于0.92ng·mL-1的VK3，6次平行测定结果的标准偏差RSD为1.64％。应用此方法对血清中VK3含量进行了测定，方法的平均回收率为99.91％，RSD为1.03％；在方案的实施过程中，天津市南开医院和天津市人民医院两个中心分别完成158例和162例，年龄组例数分布均衡，差异无统计学意义，达到临床试验方案设计要求；LK2006电化学工作站的检测结果的95％医学参考值范围为0.1～1.2ng·mL-1。
　　2、采用二次还原法制备了的纳米银颗粒粒度分布均匀、颗粒小，没有明显团聚；峰电流(ip)与Ag+的浓度(C)在2.5～40ng·mL-1范围内呈现良好的线性关系，对于20ng·mL-1的AgNO3标准品的6次平行测定结果的标准偏差RSD为1.02，重现性良好。
　　结论：
　　1、差分脉冲溶出伏安法与高效液相色谱法(HPLC)相比测定VK3简单、快速、灵敏度高，可作为血清中VK3的高敏检测方法；
　　2、由于差分脉冲溶出伏安法灵敏度高，加之经过含硫杯芳烃修饰的电极选择性好等特点，所开发方法可作为游离Ag+的高灵敏检测方法，适用于评价纳米银颗粒的稳定性和Ag+的溶出率，对于开发优质抗菌纳米银材料有指导意义。

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