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移植骨髓间充质干细胞对奶山羊生长及乳腺发育的影响

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第1章 绪论

1.1 乳腺的发育概况

1.1.1 乳腺的形态结构

1.1.2 乳腺组织学发育

1.1.3 乳腺发育与分化

1.1.4 乳腺的发育及其调控

1.2 骨髓间充质干细胞的概述

1.2.1 骨髓间充质干细胞的研究进展

1.2.2 骨髓间充质干细胞的分离培养

1.2.3 骨髓间充质干细胞的生物学特性

1.2.4 间充质干细胞的应用

1.3 骨髓间充质干细胞对乳腺发育的影响

1.4 本文研究目的、方法和意义

1.4.1 研究目的

1.4.2 研究方法

1.4.3 技术路线图

1.4.5 研究意义

第2章 试验研究

2.1 试验一 BMSCs的分离培养和鉴定

2.1.1 材料和方法

2.1.2 结果与分析

2.1.3 讨论

2.1.5 小结

2.2 试验二 注射骨髓间充质干细胞对奶山羊乳腺发育的影响

2.2.1 材料与方法

2.2.2 结果与分析

2.2.3 讨论

2.2.4 小结

2.3 试验三 注射骨髓间充质干细胞对奶山羊生长的影响

2.3.1 材料与方法

2.2.2 结果与分析

2.2.3 讨论

2.2.4 小结

2.4 试验四注射骨髓间充质干细胞对奶山羊血清中营养物质部分代谢指标的影响

2.4.1 材料与方法

2.4.2 结果与分析

2.4.3 讨论

2.4.4 小结

2.5 试验五注射骨髓间充质干细胞对奶山羊血清激素水平的影响

2.5.1 材料与方法

2.5.2 结果与分析

2.5.3 讨论

2.5.4 小结

2.6 试验 六注射骨髓间充质干细胞对奶山羊血清生长因子水平的影响

2.6.1 材料与方法

2.6.2 结果与分析

2.6.3 讨论

2.4.4 小结

第3章 结论和展望

3.1 结论

3.2 问题及展望

参考文献

附录

致谢

个人简历

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摘要

本试验通过注射骨髓间充质干细胞,来研究其对萨能奶山羊生长及乳腺发育的影响,此次试验取健康奶山羊羔羊的后肢部位,利用两种方法在体外得到了奶山羊骨髓间充质干细胞(BMSCs),对其观察鉴定,并用茜素红和油红O染色检测其体外诱导能力。试验结果最后表明获得的细胞是奶山羊骨髓间充质干细胞,具有良好的形态,可以分化,并且能较好的增殖。饲养2月龄的奶山羊16只,体重接近、无疾病,随机分成对照组和试验组,把培养好的干细胞通过奶山羊颈部静脉注射至体内,对照组注射同样的生理盐水。两组饲喂方式相同。试验开始于2月龄,结束于9月龄,每月注射1次,试验时间为7个月。每个月空腹测量体尺、体重。颈静脉采血,制备血清。在青春期3月、青春期5月和妊娠期2月进行乳腺组织样品采集,制备冰冻切片,观察记录各组乳腺组织导管数和腺泡数。血清中指标含量均送到生物公司检测。
  试验结果:注射BMSCs后,奶山羊从4月龄开始,其平均体重试验组显著高于对照组(P<0.05);在3、7、8、9月龄的奶山羊,其平均日增重试验组显著高于对照组(P<0.05);青春期5月的奶山羊,其乳腺导管数、腺泡数试验组均显著高于对照组(P<0.05);妊娠期2月的奶山羊,其乳腺发育试验组明显快于对照组(P<0.05),导管生长更明显,且其导管数、腺泡数试验组均显著高于对照组(P<0.05)。5、8月龄的奶山羊,TP含量试验组显著高于对照组(P<0.05);5、6、7月龄的奶山羊,ALB含量试验组显著高于对照组(P<0.05);4、5月龄的奶山羊,LDH水平试验组显著高于对照组(P<0.05);两组血清中ALP水平试验组均高于对照组,在6月龄时表现差异显著(P<0.05);5、7、8、9月龄的奶山羊,IGF-1、 TGF-α含量试验组显著高于对照组(P<0.05);5月龄的奶山羊,EGF含量试验组显著低于对照组(P<0.05);7、9月龄的奶山羊,EGF、TGF-β含量试验组显著高于对照组(P<0.05);8、9月龄的奶山羊,其乳房宽度、乳房深度试验组显著高于对照组(P<0.05)。
  结论:奶山羊注射BMSCs后,试验奶山羊血清中TP、Alb、ALP、LDH的含量显著提高,使试验奶山羊的生长速度加快,在3月龄时生长速度显著增加。同时在奶山羊妊娠期,增加了血清中P、E2、PRL、GnRH、LH和FSH含量。奶山羊试验全期中,IGF-1、TGF-α和EGF含量增加,抑制TGF-β分泌,乳腺组织导管腺泡发育,使乳房变大,在5月龄时乳腺发育显著。

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