异常黑胆质成熟剂在异常黑胆质型肝癌病证大鼠模型中对p53、p21、Id4、ANG、G6PC基因表达的影响

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目的：通过检测维医异常黑胆质型肝癌病证模型大鼠肝脏组织中5种候选基因的表达水平，探讨异常黑胆质成熟剂的抗肝癌作用；
　　方法：根据维吾尔医学理论体系，采用干寒饲养环境，干寒属性饲料，间断足底电刺激，强迫游泳，夹尾等多因素复合作用3周建立异常黑胆质证载体大鼠模型后，经二乙基亚硝胺（DEN）诱导20周建立维医异常黑胆质型肝癌病证大鼠模型，同时用异常黑胆质成熟剂按高、中和低（6.0、3.0和1.5 g/kg）剂量全程干预。应用光镜观察肝脏标本形态学变化确定动物模型是否成功，利用基因表达谱芯片技术筛选大鼠肝脏差异表达的p53、p21、Id4、ANG、G6PC等候选基因，通过RT-qPCR方法进行验证，免疫组织化学方法检测p53和p21基因的蛋白表达水平；
　　结果：RT-qPCR结果显示，与正常组相比对照肝癌组p53基因mRNA表达水平上调（P＜0.01）；与对照肝癌组相比，异黑肝癌组p53基因mRNA表达水平上调（P＜0.01）；与异黑肝癌组相比，成熟剂三个剂量组p53基因mRNA表达水平均下调，其中高剂量组和中剂量组差异有统计学意义（P＜0.05）；与正常组比，对照肝癌组p21基因表达上调（P＜0.01）；与对照肝癌组比较，异黑肝癌组p21基因表达上调（P＜0.05）；与异黑肝癌组相比，成熟剂3个不同剂量组肝组织p21基因表达均下调，其中成熟剂中、低剂量组下降明显（P＜0.01）；与正常组比较对照肝癌组Id4基因表达下调（P＜0.01）；与对照肝癌组比较，异黑肝癌组Id4基因表达下调（P＜0.01）；与异黑肝癌组相比，成熟剂3个不同剂量组肝组织Id4基因表达均上调，其中成熟剂高、中剂量组升高显著（P＜0.01）；与正常组比较对照肝癌组ANG基因表达下调（P＜0.05）；与对照肝癌组比较，异黑肝癌组ANG基因表达下调（P＜0.05）；与异黑肝癌组相比，成熟剂3个不同剂量组ANG基因表达均上调（P＜0.05）；与正常组比，对照肝癌组G6PC基因表达下调（P＜0.01）；与对照肝癌组比较，异黑肝癌组G6PC基因表达下调（P＜0.05）；与异黑肝癌组相比，成熟剂3个不同剂量组肝组织G6PC基因表达均上调，其中成熟剂高和中剂量组上调明显（P＜0.05，P＜0.01）；免疫组织化学结果显示，与正常组相比对照肝癌组P53蛋白表达水平明显上调，差异有统计学意义(P＜0.01)。异常黑胆质型肝癌病证模型组与对照肝癌组相比P53蛋白表达水平上调，差异有统计学意义(P＜0.05)。异常黑胆质成熟剂高，中，低三个剂量组与异常黑胆质型肝癌病证模型组相比，P53蛋白水平均下调表达，其中成熟剂中剂量组和低剂量组下调明显（P＜0.01）；与正常组相比对照肝癌组P21蛋白表达水平上调显著，差异有统计学意义(P＜0.01)。异常黑胆质型肝癌病证模型组与肝癌对照组相比P21蛋白表达水平上调，差异有统计学意义(P＜0.05)。异常黑胆质成熟剂高，中，低三个剂量组P21蛋白表达水平与异常黑胆质型肝癌病证模型组相比均下调，差异有统计学意义（P＜0.05）；
　　结论（1）异常黑胆质型肝癌的发生与p53、p21，Id4、ANG、G6PC等基因的表达调控异常有关，异常黑胆质成熟剂通过影响上述基因的表达使其以不同程度地逆转。（2）在该动物模型肝脏组织中，异常黑胆质成熟剂通过影响p53、p21、ANG基因的表达而可能改变多种癌基因的重要转录因子c-myc基因的表达起抗肝癌作用。（3）Warburg效应是肿瘤中物质代谢的特点之一，而葡萄糖-6-磷酸酶是糖异生中的最后一个关键酶，因此，我们认为异常黑胆质型肝癌组中G6PC的表达下调有利于糖异生的中间产物用于肿瘤不可控生长所需物质的生物合成。

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作者
祖力皮喀尔·阿卜杜热合曼;
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作者单位

新疆医科大学;

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授予单位新疆医科大学;
学科生物化学与分子生物学
授予学位硕士
导师姓名斯坎德尔·白克力,王延蛟;
年度 2017
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类肝肿瘤;医用实验动物学;
关键词
肝癌; 黑胆质成熟剂; 基因表达; 抗肝癌作用;

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