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Survivin、bcl-2和bax在反复自然流产绒毛组织中的表达及意义的研究

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前言

研究内容与方法

1 研究对象

2 主要试剂

3 内容与方法

4 统计学方法

结果

1 免疫组化染色结果表明RSA组绒毛膜中Survivin分子和Bcl-2分子的表达下降,同时也发现Bax的表达上升

2 RSA组和正常早孕人流组绒毛细胞凋亡分析

3 RSA分子生物学分析表明RSA组绒毛膜中前两种基因表达下降,同时后一种基因表达上升

4 三种靶基因表达的相关性

讨论

1 细胞凋亡与RSA的关系

2 抑凋亡基因Surivivin在RSA中的发挥一定的作用

3 抑凋亡基因Bcl-2与RSA的发生发展相关

4 促凋亡基因Bax通过与Bcl-2基因关联而对RSA起到促进作用

5 Bcl-2/Bax的比值通过调节细胞凋亡而影响RSA的发生

小结

致谢

参考文献

附录

综述

攻读硕士学位期间发表的学术论文

个人简历

导师评阅表

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摘要

目的:反复自然流产(RSA)是指连续3次以上早期流产,是妇科临床常见疾病。该病受到多种内外因素影响,具体发病机制目前尚不十分清楚。近来研究提示凋亡因素对于RSA的发生起着重要作用。本课题旨在检测RSA患者妊娠绒毛组织中Survivin、Bcl-2和Bax基因的表达及绒毛膜细胞凋亡,分析Survivin、Bcl-2和Bax与绒毛细胞凋亡的关系以及与RSA的相关性,为探索RSA的发病机制及诊疗提供依据。
  方法:临床收集RSA患者和正常早孕人流患者绒毛膜标本,用免疫组织化学染色检测 Survivin、Bcl-2和Bax的表达情况,计算阳性表达率;用末端转移酶标记技术(TUNEL)检测两组绒毛细胞中的凋亡细胞数量并计算凋亡指数。用Western blotting方法检测两组绒毛膜中Survivin、Bcl-2和Bax分子的表达;用Real time PCR方法检测Survivin、Bcl-2和Bax基因mRNA的表达,运用Cox回归分析Survivin与Bcl-2及Bax表达相关性。
  结果:免疫组织化学染色显示正常对照组绒毛细胞中Survivin、Bcl-2和Bax表达率分别为85.36±8.64%、78.32±7.51%和20.05±4.65%;RSA组绒毛细胞中Survivin、Bcl-2和Bax表达率分别为44.59±7.37%、51.46±6.33%和86.73±10.92%。RSA组中Survivin和Bcl-2表达明显低于正常人流组(p<0.05),RSA组中Bax表达明显高于早孕人流组(p<0.05)。RAS组和对照组绒毛膜细胞凋亡指数分别为49.57±6.81%和8.26±2.13%,RAS组明显高于早孕人流组(p<0.05)。Western blotting和Real-time PCR检测结果均表明:与正常人流组相比,RSA组绒毛细胞中Survivin和Bcl-2表达降低,Bax表达升高。相关性分析结果表明:在RSA组绒毛细胞中Survivin基因的表达与Bcl-2基因表达关系为正相关(r=0.42, p<0.05),与Bax基因的表达关系为呈负相关(r=0.51, p<0.05)。
  结论:RSA组绒毛细胞中Survivin与Bcl-2表达减弱,同时Bax表达增强。RSA组绒毛细胞凋亡增加。在RSA发病过程中Survivin与Bcl-2具有协同作用,与Bax具有拮抗作用。

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