FOXP3、CD4+CD25+调节性T细胞、TLR2和TLR9在儿童传染性单核细胞增多症发病中的作用

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目的：本研究旨在探讨CD4+CD25+Treg(CD4+CD25+调节性T细胞,CD4+CD25+ regulatory T cells)及其转录因子FOXP3在儿童传染性单核细胞增多症( Infectious mononucleosis IM)发病中的作用，观察TLR2(Toll-like receptor2)和TLR9(Toll-like receptor9)在传染性单核细胞增多症患儿外周血单个核细胞上的表达以及血浆白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)、白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)、转化生长因子β1(Transforming Growth Factor-β1,TGF-β1)、γ干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)水平,为IM的免疫治疗方案提供理论依据及新策略。方法：研究对象为本院(四川省人民医院)儿科2010年2月至2011年2月收治的急性期IM患儿35例(IM急性期组),IM恢复期组35例(经治疗临床症状体征完全消失,病程一月时)以及健康对照儿童35例(对照组)。1、运用SYBR Green荧光定量PCR方法,检测我院儿科诊治的35例IM急性期组患儿、IM恢复期组患儿、35例健康对照组外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)FOXP3mRNA、TLR2 mRNA、TLR9 mRNA的表达水平,目标基因的相对表达分析采用参照基因的△CT法,即(2(referenceCT–targetCT))。2、所有标本的血浆中的细胞因子水平分别运用液相芯片技术和双抗体夹心法检测。3、外周血中本实验所需要检测的T淋巴细胞亚群的表达率采用流式细胞术检测。4、统计学处理:采用SPSS16.0统计软件分析,采用one-way ANOVA比较IM急性期组、IM恢复期组、对照组间的差异,P﹤0.05表示有统计学意义。结果：1、IM急性期组儿童PBMC中TLR2 mRNA相对表达水平(4.03±0.56)显著高于空白对照组儿童相对表达水平(2.22±0.57)(P﹤0.01),IM恢复期组PBMC中TLR2 mRNA相对表达水平(2.76±0.83)显著低于IM急性期组儿童相对表达水平(4.03±0.56)(P﹤0.01);2、IM急性期组儿童PBMC中TLR9 mRNA相对表达水平(8.88±1.56)显著高于对照组儿童TLR9 mRNA相对表达水平(3.63±1.30)(P﹤0.01),IM恢复期组PBMC中TLR9 mRNA相对表达水平(5.34±1.60)显著低于IM急性组儿童相对表达水平(8.88±1.56)(P﹤0.01)。3、IM急性期组儿童PBMC中FOXP3mRNA相对表达水平(2.82±0.90)显著低于对照组儿童相对表达水平(4.65±1.23)(P﹤0.01),IM恢复期组PBMC中FOXP3mRNA相对表达水平(4.11±1.37)与对照组儿童相对表达水平(4.65±1.23)比较无统计学意义(P>0.05)。4、IM急性期组儿童血浆细胞中的因子IL-2、IL-10的表达值分别为:42.97±16.36pg/ml、39.84±3.95pg/ml,对照组儿童血浆中的细胞因子IL-2、IL-10的表达值分别为:84.02±28.67pg/ml、69.86±3.95 pg/ml。IM恢复期组儿童血浆细胞中的因子IL-2、IL-10的表达值分别为:58.85±19.42 pg/ml、53.34±5.21pg/ml。IM急性期组儿童较对照组儿童降低,IM恢复期组儿童较急性期组儿童升高,三组比较差异有统计学意义(P﹤0.01)。IM急性期组儿童血浆中的细胞因子IFN-γ(108.82±14.34 pg/ml)、TGF-β1(488.15±117.5 pg/ml)的表达水平较对照组儿童IFN-γ(22.00±9.74 pg/ml)、TGF-β1(253.75±72.6 pg/ml)增高,IM恢复期组儿童血浆中的细胞因子IFN-γ(49.82±11.55 pg/ml)、TGF-β1(318.62±90.1pg/ml)的表达水平较IM急性期组儿童IFN-γ,TGF-β1降低,三组比较差异有统计学意义(P﹤0.01)。5、IM急性期组儿童 CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+/CD8+、CD4+CD25+测定结果分别为80.66±4.88％、16.53±5.55％、62.71±8.76％、0.26±0.12、2.38±1.32％,对照组儿童CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+/CD8+、CD4+CD25+测定结果分别为63.04±5.51％、37.98±4.20％、27.71±6.52％、1.37±0.45、7.85±1.97％,IM急性期组儿童与对照组儿童比较差异均有统计学意义(P<0.01),IM恢复期组儿童CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+/CD8+、测定结果分别为74.25±7.33％、29.89±6.03％、42.25±7.33％、0.71±0.19,与急性期组儿童比较有统计学意义(P<0.01),IM恢复期组儿童CD4+CD25+测定结果为6.81±1.84％,与对照组比较无统计学意义(P>0.05)。结论：1、IM急性期存在T细胞亚群的失衡,由此导致的免疫抑制功能不足可能是免疫失衡的重要原因之一,从CD4+CD25+Treg细胞角度及其调控的分子机制阐明IM免疫失蘅的发病机理之一;2、证明TLR2和TLR9参与IM发病,TLR2和TLR9对CD4+CD25+Treg可能存在调控作用;3、证明细胞因子参与了IM发病,从细胞因子角度认识IM发病机制;4、为IM的免疫治疗提供实验依据及新策略。

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作者
王佐凤;
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作者单位

西南医科大学;

泸州医学院;

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授予单位西南医科大学;泸州医学院;
学科儿科学
授予学位硕士
导师姓名王强;
年度 2012
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类 R725.105;
关键词
儿科学; 传染性单核细胞增多症; 免疫治疗; FOXP3转录因子; CD4+CD25+调节性T细胞; TLR2基因; TLR9基因;

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