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【6h】

星形胶质细胞对内侧膝状体神经元听反应电活动的影响

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摘要

缩略语表

1 前言

2 材料和方法

2．1 实验动物

2．2 技术路线

2．3 主要试剂、药物及溶液配制

2．4 主要设备／仪器

2．5 动物手术

2．5．1 动物麻醉和术前准备

2．5．2 耳蜗摘除术

2．5．3 开颅术

2．6 脑室注射fluorocitrate

2．7 声音刺激与信号采集、记录

2．8 数据分析

2．9 尼氏染色

2．9．1 电损毁

2．9．2 灌流、取脑

2．9．3 尼民染色

2．9．4 图像获取

3 结果

3．1 正常组大鼠脑室注射药物FC后MGv神经元的电活动交化

3．2 单侧耳蜗摘除不同时间段大鼠摘除同侧MGv神经元电活动变化

3．3 单侧耳蜗摘除后不同时间段大鼠脑室注射药物FC前后，MGv神经元的电活动交化

3．4 MGB神经元不同亚区的声反应特性差异

4 讨论

5 结论

参考文献

附(综述)听觉丘脑中MGB神经元的刺激-特异性适应(SSA)概述

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摘要

哺乳动物神经系统内含有两大类细胞:神经细胞（神经元）和神经胶质细胞;其中，胶质细胞又以星形胶质细胞(astrocyte)为主。研究证实，星形胶质细胞在认知、运动、情感及感觉等信息的处理过程中都发挥着重要的作用。内侧膝状体(medial geniculate body，MGB)是声音信息在脑内传递必不可少的重要接替核团，可分为三个主要的亚区:腹部(ventral division of MGB，MGv)、背部(dorsal division of MGB，MGd)和中间部(medial division of MGB，MGm)。已有研究表明，星形胶质细胞在中枢感觉系统神经元的可塑性过程中发挥一定作用，但是对听觉系统（尤其是听觉丘脑MGB神经元）功能可塑性作用还鲜有研究报道。
　　目的：研究星形胶质细胞在MGB神经元可塑性中的作用。
　　方法：将SD大鼠单侧耳蜗摘除(cochlear ablation，ab)，使其存活不同时间，在脑室注射氟代柠檬酸(fluorocitrate，FC)后，通过细胞外电生理记录，观察、统计和分析MGB神经元动作电位在星形胶质细胞功能抑制前后的发放模式、发放数(spike counts)、第一动作电位发放延时(first spike latency，FSL)、最低闽值(minimum threshold，MT)、频率调谐曲线(frequency tuning curve，FTC)等指标的变化。
　　结果：1、正常组大鼠注射药物FC前后MGv神经元电活动改变:MGv神经元注药后MT升高、spike counts减少、FSL延长，其结果均具有统计学意义。
　　2、耳蜗摘除后大鼠摘除同侧的MGv神经元电活动变化:(1)发放模式:在噪声刺激下，对照组MGv神经元声诱发电位波形整齐、规律;单次声诱发电位波形明显。与对照组相比，ab组MGv神经元的声诱发反应电位波形发生不同程度改变且自发放电增多，组间比较发现，ab24h、ab7d、ab14d组的自发放增多最为明显;单次诱声反应电位波形发生改变，表现为几个连续的发放;ab各组组间比较无差异。(2)MT:与control组相比，ab各组MGv神经元的MT随耳蜗摘除时间的延长，发生不同程度升高;ab各组组间比较发现，ab30d组MGv神经元的MT明显高于ab4h、ab24h、ab7d组。(3)spike counts:与对照组相比，ab组MGv神经元spike counts均发生不同程度减少，其中，以ab4h、 ab14d、 ab30d组spikecounts的减少最为明显;ab各组组间比较无差异。(4) FSL:与对照组相比，ab组MGv神经元FSL均发生不同程度延长，其中，以ab4h组FSL延长最为明显;ab各组组间比较发现，ab24h、ab7d、ab14d、ab30d组MGv神经元的FSL皆明显短于ab4h组，其中，以ab7d、ab14d组的FSL缩短最为明显，而ab24h组较ab14d组的FSL则延长，其结果均具有显著性差异。
　　3、耳蜗摘除后不同时间段大鼠摘除同侧的MGv神经元在注射FC前后的电活动变化:(1)MT:组内比较，在注射药物FC后，ab4h、 ab24h、ab7d、ab14d组的MT总体高于注药前，而ab30d组的MT则低于注药前，其中，以ab14d组的MT变化最为明显;组间比较，ab4h、ab7d组较ab30d组之间，以及ab4h、ab14d组较ab7d组之间注药前后的改变具有显著性差异。(2) spike counts:组内比较，在注射FC后，ab4h、ab24h、ab7d、 ab14d组的spike counts总体少于注药前，而ab30d组spike counts则多于注药前，其中，ab4h、 ab24h、ab7d和ab30d组的的改变最为明显;组间比较，ab4h、ab24h、ab7d、ab14d组较ab30d组之间，ab24h、 ab14d较ab7d组之间，以及ab4h组较ab24h组之间注药前后的改变具有显著性差异。(3) FSL:组内比较，在注射药物FC后，ab4h组的FSL总体较注药前缩短，而ab24h、ab7d、 ab14d、ab30d组的FSL较注药前则延长，其中，以ab24h组和ab7d组的FSL在注药前后的改变最为明显;组间比较，ab24h、ab7d、ab30d组改变较ab4h组具有显著性差异。
　　4、对MGB神经元不同亚区声反应特性差异的研究发现:(1)在纯音刺激下，正常组大鼠MGm的spike counts明显少于MGv和MGd; MGv和MGm的MT高于MGd;MGd的FSL长于MGv和MGm。(2)注射药物FC抑制星型胶质细胞功能后，正常组大鼠MGv神经元CF向高频音移动，MT升高;而MGd、MGm神经元的CF和MT则基本保持不变。
　　结论：1、星形胶质细胞功能变化，能影响MGv神经元的声反应特性。
　　2、大鼠单侧耳蜗摘除后，摘除同侧的MGv神经元发生了可塑性改变。
　　3、星形胶质细胞参与了MGv神经元的可塑性过程。
　　4、星形胶质细胞功能改变对MGB神经元的三个不同亚分区（即MGv、MGd、MGm）的作用各不相同。

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