CymMV和ORSV对蝴蝶兰叶片中表达蛋白的影响及CymMV TGB1和TGB2基因的原核表达

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致谢

摘要

第一章 文献综述

1 兰科植物病毒简介

1．1 兰科植物病毒概述

1．2 建兰花叶病毒(CymMV)

1．3 齿兰环斑病毒(ORSV)

2 蛋白质组学及研究技术

2．1 蛋白质组学概述

2．2 蛋白质分离技术-双向电泳

2．3 蛋白质的鉴定-质谱技术

2．4 生物信息学分析

2．5 蛋白质组研究的其他技术

3 蛋白质组学在植物学中的应用

3．1 植物响应非生物胁迫蛋白质组学

3．2 植物响应生物胁迫的蛋白质组学

4 TGB研究概述

5 研究的目的和意义

第二章 CymMV和ORSV对蝴蝶兰叶片中表达蛋白的影响

1 材料、试剂和设备

1．1 材料

1．2 实验试剂

1．3 实验仪器设备

2 实验方法

2．1 蝴蝶兰叶片分子检测

2．2 感病蝴蝶兰叶片总蛋白提取

2．3 单向SDS-PAGE

2．4 双向电泳方法

2．5 双向图谱获得及分析

2．6 蛋白点的切取和酶解

3 实验结果

3．1 Bradford法蛋白浓度测定标准曲线

3．2 单向SDS-PAGE蛋白样品配平

3．3 蛋白裂解液的选择

3．4 染色方法对蝴蝶兰叶片总蛋白图谱的影响

3．5 不同感病处理的蝴蝶兰叶片双向电泳图谱分析

3．6 差异表达蛋白的质谱鉴定结果

4 分析与讨论

4．1 抗病相关蛋白

4．2 胁迫应答蛋白

4．3 转录调节

4．4 能量代谢蛋白

4．5 蛋白质修饰

4．6 未分类蛋白

第三章 建兰花叶病毒TGB1和TGB2基因的原核表达

1 材料和试剂

1．1 菌株和质粒

1．2 植物材料

1．3 实验试剂

2 方法

2．1 CymMV TGB1、TGB2基因的克隆

2．2 原核表达载体构建

2．3 TGB1、TGB2蛋白诱导表达

2．4 TGB1、TGB2蛋白检测

3 结果与分析

3．1 总RNA的提取

3．2 TGB1、TGB2基因的的克隆

3．3 pGEX-TGB1、pGEX-TGB2表达载体构建

3．4 TGB1、TGB2蛋白表达检测

3．5 讨论

第四章 研究总结

参考文献

附录一 主要英文缩略词表

附录二 常用缓冲液及试剂配制

个人简历